实验二十、植株生长量测定

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1、实验二十、植株生长量的测定指示植物在药剂处理过的土壤中或混药的水溶液中培养一定时间后，测定植株的生长量，如禾本科植物可测量叶子长度，阔叶植物可测量叶面积；或将地上部分切下称其鲜重。抑制光合作用的除草剂常用这类方法。1、去胚乳小麦幼苗法去胚乳小麦幼苗法也是上海植物生理研究所1964年建立的生测方法。这是一个测定抑制光合作用除草剂的专一方法，与测定这类除草剂的其它生测方法（如番茄法、燕麦法）相比，它具有操作简便、测定周期短等优点。选择饱满度一致的小麦，浸种2h后，排列在铺有湿滤纸或纱布的搪瓷盘内，在20℃左右进行发芽。培养3-4天后苗高

2、2-3cm，精选高度一致的幼苗，轻轻取出以免损伤根部，然后摘除胚乳，在水中漂洗后作为指示生物。以直径4.5cm，高5.0cm的小玻璃杯作为测定容器，每杯放入不同浓度的药液3ml和稀释10倍的培养液6ml，每杯插入上述去胚乳小麦幼苗10株。在温度21～26℃左右，光照下培养6～7天，测定小麦苗的株高，以株高抑制率来表示除草剂活性。培养液配方如下：硫酸铵3.2g磷酸二氢铵2.25g硫酸钙0.8g氯化钾1.2g硫酸镁1.2g微量元素0.01g其中微量元素组成为：硫酸亚铁10g、硫酸铜3g、硫酸锰9g、硼酸7g硫酸锌3g将上述配方加入1L水

3、中，使用时再稀释10倍。2、番茄法取20×120mm的试管，编号。将供试药剂用培养液稀释成一系列梯度浓度溶液，每只试管加入10mm。严格挑选生长健壮，大小高度一致的具2片真叶的番茄幼苗，将主根及子叶剪掉，称鲜重后插入试管，每管2～4株，在漫射光照射下，25℃左右培养2周，然后再取出称重。培养期间应每天补加蒸发的水分。以生长抑制率来评价活性，求出EC50，比较活性。生长抑制率（％）=番茄法适合于脲类及均三氮苯类光合作用抑制剂的生物测定，方法灵敏，但培养周期较长，其间要每天补足水分，比较麻烦。3、燕麦法将土样烘干。过lmm筛后。加入除草

4、剂，使土壤水分达到最大田间持水量的60％。取200g土装人底部带孔的玻璃皿中，播种已催芽露白的燕麦种子10－12粒，出苗后，定8株苗，每天从底部灌水，保持原来的重量，于光照下培育14d后，测定植株地上部鲜重与干重，或幼龄叶片数及第2、3叶片的重量，计算IC50。本法适于测定均三氮苯类除草剂如阿特拉津、西玛津以及取代脲类除草剂的活性，淋溶及持效期等。前者灵敏度0.05-0.1ppm，后者为0.1-0.3ppm。此外，也可测定幼苗的含水量、水提取物的导电性及中性水溶性物质重量及其占干重的百分数。由于抑制光合作用除草剂引起植物蒸腾作用下降

5、（气孔关闭引起的），而根系吸水不受影响，因此，在鲜重与干重明显下降之前，植物体内含水量反倒明显增加。因此，可用幼苗含水量作为生测指标一此类除草剂也使植株体内中性水溶性物质（碳水化合物）的含量在干鲜重下降前明显下降，因而可以测定中性水溶性物质（糖）的含量为生测指标，比测定干鲜重更为灵敏。4、叶鞘滴注法Tarlor和Loader（1984）为了筛选有效的防治野燕麦的除草剂混剂，设计了一种快速，简便的除草剂生测方法——叶鞘滴注法。当正常生长的燕麦长至1叶1心时，在第一叶张开的叶鞘里滴加10ul供试的一定浓度的除草剂。24-48h后，切下2

6、㎝长的一段，插入清水洋菜培养基。再经24h（此时对照叶片伸长约11～13㎜）取出测量每一剂量处理的叶片延伸长度，并评判除草剂活性。5、萝卜子叶法将萝卜籽插入整滤纸的培养血中，加适量水，加盖后在27℃培养箱中黑暗培养30h，从幼苗上切下子叶备用。在盛有用磷酸盐缓冲液配制的不同浓度的除草剂（5－10ml）溶液中放入10片大小均匀的子叶，加盖后在25－27℃温室或生长箱中。光照强度为2000—3000LX的光照下连续培养3d后。称鲜重并测定叶绿素含量，计算IC50。本法适于测定触杀性及影响氮代谢的除草剂。6、再生苗侧重法。将生长均匀一致的

7、10株香附子块茎移植到盆钵中。二周后生长正常时，分别用不同浓度的草甘磷处理香附子叶，一周后剪除香附子茎叶（距上表1cm），再过一个月左右测定再生苗的鲜重，这样可反映传导性除草剂对地下部分再生能力的抑制程度。也可用玉米做试材，将玉米将播种在统一型号盆钵中，当幼苗3叶期时喷施草甘磷，24小时后剪去叶片，一周后测定再生苗的鲜重，比较不同处理间的再生力。7、茎叶浸渍法：该法适用于茎叶处理剂的筛选和测定。方法是取一个底部带孔的啤酒杯，装满潮湿细土（肥沃土壤较好）后压实，再用塑料薄膜包住整个杯上并用橡皮筋扎紧，以防止倒置浸药时杯中土壤散落。其后

8、在薄膜上沿杯边缘戳若干孔穴。每穴播入2-3粒供试植物种子并用土覆盖好，然后从底部渗入水保持土壤湿润。供试植物长至2-3叶期时进行间苗，每穴保苗1株苗。待植物长至需要大小时，进行浸药处理。浸药时间各处理之间力求一致。药剂处理数天后可揭去