盐酸青藤碱抗肾间质纤维化的实验研究_1

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果盐酸青藤碱抗肾间质纤维化的实验研究【关键词】减轻肾损害摘要目的:探讨盐酸青藤碱在治疗肾间质性纤维化中的作用及其发生机制，为临床上进一步防止肾小球和肾小管间质纤维化提供一些借鉴。方法:采用小鼠单侧输尿管结扎法诱导肾间质纤维化的动物模型，用盐酸青藤碱治疗，并设对照组、假手术组、治疗组，检测血尿素氮、血肌酐、血清层粘连蛋白、纤维连接蛋白的含量，免疫组化法检测组织转化生长因子β1的表达并进行肾脏病理学的观察。结果:3组比较，对照组BUN、SCr明显高于治疗组，

2、略高于假手术组，但统计学比较无显著性差异;治疗组TGF-β1及FN均明显低于对照组、假手术组;LN亦较对照组、假手术组低。对照组、假手术组肾小管结构消失，代之以弥漫性纤维组织增生及单核细胞浸润;治疗组虽也肾小管萎缩、扩张，但病变较轻，绝大多数肾小管结构尚存，炎性细胞浸润也多呈局灶样分布。结论:盐酸青藤碱能降低BUN、SCr、FN、LN的含量以及TGF-β1表达，抑制间质纤维化，减轻肾损害，从而延缓肾脏疾病的发展。关键词肾间质性纤维化;层粘连蛋白;纤维连接蛋白;组织转化生长因子-β1大量动物实验和人类肾小球疾病临床病理研究课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一

3、年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果发现肾小球疾病的发展和预后与肾小管、肾间质病变的严重程度密切相关，据多因素分析表明，肾小管及肾间质纤维化是决定肾衰竭进展的最重要影响因素，也是大部分肾小球疾病发展的共同最终通路［1］，有报道［2］:在肾小球疾病的慢性进展中，肾小球滤过率的下降速率与肾小管、间质病变程度的关系更密切。因此，临床寻找有效药物阻止肾间质纤维化，延缓肾功能进展有重要意义，本实验旨在探讨中药盐酸青藤碱抗肾间质纤维化的作用机制。1材料

4、与方法实验材料动物:雄性Wister大鼠40只，体重180g～200g，由同济医大学动物实验中心提供。药物:湖南正清制药集团股份有限公司生产正清风痛宁缓释片。试剂:LN试剂盒购于上海海军医学研究所生物技术中心，TNF-β1免疫组化染色试剂盒，购于北京中山生物技术有限公司。仪器:722分光光度计、HPISA-1000全自动图象分析系统。1.实验方法分组:大鼠适应性地喂养7d，然后随机分为3组，对照组、假手术组、治疗组，每组各15只。造模:三组大鼠均行右侧输尿管结扎术按照参考课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从

5、本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果文献［4］进行。治疗:造模第2d，给假手术组小鼠每日按10mL/kg体重生理盐水灌胃，直至治疗结束，治疗组选用湖南正清制药集团产正清风痛宁缓释片按每日30mg/kg体重给小鼠灌胃，连续3W。观察指标及标本采集:给药3W后，各组大鼠眼球后静脉丛取血，血尿素氮、血肌酐、测血清层粘连蛋白、组织转化生长因子-β1，然后处死大鼠，取出右肾，生理盐水冲洗，除去非肾脏组织，置于10%的甲醛液中固定，以备免疫组化及光镜观察。结果判定及记录:肾小管间质病理改变的标准［3］

6、:肾小管扩张、萎缩，间质纤维化及炎细胞浸润，肾小管间质损害程度参照国内唐政分法分3级:Ⅰ级小管间质病变散在轻微，范围1.统计学分析计量资料均以x±s表示，采用方差分析，以P结果.1各组大鼠血清BUN、SCr、FN、LN以及TGF-β1的含量表1各组大鼠血清BUN、SCr、FN、LN以及TNF-β1的含量注:与对照组比较*P。由表1知血BUN、SCr进行3组比较，对照组BUN、SCr明显高于治疗组，略高于假手术组，但统计学比较无显著性差异;治疗组FN及TGF-β1均明显低于对照组和假手术组TGF-β1课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对

7、实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果、FN;LN亦较对照组、假手术组低。.各组动物肾小管间质纤维化程度表各组动物肾小管间质纤维化程度组别例数肾小管间质纤维化的损害程度Ⅰ级Ⅱ级Ⅲ级对照组11假手术组1治疗组18由表2可知治疗组肾小管间质纤维化的程度于对照组和假手术组比较差异明显。讨论肾小管间质纤维化是肾脏疾病进展至终末期的一种共同病理表