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1、不确定度评定在微生物学菌落总数检验方法确认中的应用陕西省产品质量监督检验所张莉李欢摘要：微生物检测实验室为了使检测结果更加客观准确，很有必耍进行检测结杲不确定度的评定。特别是在检验方法培养基成分改变确认时可用不确定度评定的方法来校验不同成分培养基在同一实验室、同一样品、同一人员、同一工作环境的测试结果。该结果除给出测定的量值是多少外，还应给出检测结果的不确定度。对不同成分培养基之间的检测结果进行不确定度的评定，确定细菌菌落总数置信区间范围。确认是否因培养基成分改变而引起的检测结杲课差以及改动后新培养基使用的可行性。关键词：菌落总数；方法确认；不确定度；Application
2、ofUncertaintyEvaluationinConfirmationofAerobicPlateCountMethodinMicrobiologyFieldAbstract:ThemicroorganisminordertokeepthelaboratoryresuItmoreobjectivelyandaccurately,hasthenecessitytocarryonlaboratoryresultuncertaintyevaluation.Especiallywhensubstratecomponentchangcs,thisuncertaintycvqIuq
3、tionmethodisavailabletoconfinnthetestresult,whichisverifiedthedifferentingredientculturemediumintheidenticallaboratory,intheidenticalsample,intheidenticalpersonnel,intheidenticalworkingconditions.Thisresultbesidesgivesthedata,butalsogivestheuncertaintyofthetestresuIt.Andconfirmwhothcrtestr
4、esulterroriscausedwhentheculturemediumingredientchanges，aswel1asnewculturemediumwhetherisused.Keywords:AerobicPlateCount,MethodConfirmation,Uncettainty廿前，寻求国家实验室能力认口J是按照CNAL/ACO1:2003《检验和校准实验室认可准则》的要求建立和运行其质量体系并等同采用了导则IS0/IEC17025:2005《检测和校准实验室能力的通用要求》在《认可准则》的的24个条款屮“检测和校准方法及方法的确认”是一个涉及如何正
5、确选择检测和校准方法、确认方法、评价方法和控制数据的重要条款，由于工作的特殊性，微生物实验室应更多地将微生物学检测结果的不确定度评定广泛应用于口常的微牛物检测屮和因培养基成分改变后和检测方法改变后检测结果的确认屮。笔者根据多年工作实践认为：微牛物检测实验室为了使检测结果更加客观准确很有必要进行检测结果不确定度的评定。确定细菌菌落总数置信区间范围。特别是在检验方法培养基成分改变确认时可用不确定度评定的方法來校验不同成分培养基，同一实验室，同一样品，同一人员，同一工作环境的测试结果。该结果除给出测定的量值是多少外，还应给出检测结果的不确定度。对不同成分培养基之间的检测结果进行不
6、确定度的评定，确认是否因培养基成分改变而引起的检测结果误差和改动后新培养基使用的可行性。用合并样本标准差的方法对检测数据进行不确定度的评定。1GB/T4789.2-2003菌落总数测定，营养琼脂培养基1.1成分蛋白腺10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂15g〜20g,蒸憾水lOOOmL.pH7.2〜7.42GB/T4789.2-2008菌落总数测定，平板计数琼脂培养基2.2成分胰蛋白豚5・0g,酵母浸膏2.5g,葡萄糖l.Og,琼脂15g,蒸憾水1000mLpH7.0±0.23测试样品的制备3.1实验室对某份乳粉制备20个均匀样品3.2检测方法的选择3.2.1依据GB/T4
7、789-2008.2笫一法平板菌落计数法：3.2.1.1以无菌操作称量25g放入盛冇225讥稀释液的无菌均质袋屮，用拍击式均质器拍打lmin〜2min,制成1：10的样品均液。3.2.1.2用lmL无菌吸管吸取1：10的样品均液ImL,沿管壁缓慢注入盛冇9n）L稀释液的无菌试管屮（注意吸管头不要触及稀释液面），振摇试管使其混合均匀，制成1：100的样品均液。3.2.1.3按2.1.2操作程序，制备10倍系列稀释样品均液。每递增稀释一次换用一次1讥无菌吸管。3.2.1.4选择2个适宜稀释度的样品均液，在进行10倍递增
