标准菌株的菌落总数测量中不确定度评定-论文.pdf

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1、应用技术YingYongJiShu·211·标准菌株的菌落总数测量中不确定度评定韩凤霞吉林市产品质量检验院　吉林　吉林　132013【摘　要】　建立了标准菌株的菌落总数的不确定度分析，表征了测量结果可疑程度，评定了由重复性测量的分散性引起的不确定度总量。本实验是取对数后用常规的贝塞尔方法进行计算。【关键词】　标准菌株；菌落总数；平板计数；不确定度评定1　材料与方法计算数值见表2。1.1标准依据（检验方法）：表2　单一样液菌落总数计算　单位：cfu/ml《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》GB4789.2-2010测量21.2仪器名称：①电热恒温培

2、养箱序号lgXilgXi－lgx（lgXi－lgx）u（lgx）结果②菌落计数器③压力蒸汽灭菌器154003.7324-0.075270.0056661.3样品情况：由权威部门提供的标准菌株。259003.7709-0.036800.0013541.4检验过程：397003.7559-0.051800.0026831.4.1取样（本实验共做3个稀释度）：1.用1.1ml缓冲液（复溶液）溶解白色球状物，即为测试样品原液；471003.85130.043600.0019012.取1ml样品原液加到9ml生理盐水中，样液为10倍稀释液——稀释度（1：10）；555

3、003.7404-0.067300.0045293.取1ml（10倍稀释液）加到9ml生理盐水中，样液为100倍稀释液——稀释度（1：100）；680003.90310.095400.0091010.022064.取1ml（100倍稀释液）加到9ml生理盐水中，样液为1000倍稀释液——稀释度（1：1000）。分别取3个稀释倍数的样液1ml，每一稀释度共做9个培养皿，将样液分别加到培养皿中，泼入培养基，进行759003.7709-0.036800.001354培养。873003.86330.055600.0030911.4.2样液培养：培养皿在37℃环境培养

4、24h。976003.88080.073100.0053441.5数学模型：N=X均值：残差和：1.6不确定来源均值或和--------3.80770.035023菌落总数的不确定度来源主要包括：重复性（测试环境、培养温度、结果修约、样品的均匀性、取样重复性、[1]2.2.2扩展不确定度人员的计数），培养条件（培养时间允差、培养湿度的允差），取样（稀释体积、取样体积）等。[2]2　结果与讨论由于置信概率P=95%，自由度v=8，查得t分布表可得k=1.860。则扩展不确定度为：2.1菌落总数的结果数据U95=k95×u（lgx）=1.860×0.02206=

5、0.04103本实验由实验室内同一人员在同一环境下取均匀的样液、在同一温度下培养的结果，结果见表1。从数据上看，由于lgX与X之间的非线性关系，不能直接求出扩展不确定度U的反对数值，因此，首先确定lgX的取值范围由于测量结果发散性较大，这也是微生物测量中的特点。因此测量过程中的其他不确定度来源均可忽略不计。为lgX=3.8077±0.0410表1　单一样液菌落总数检验结果汇总　单位：cfu/ml或写成3.7667≤lgX≤3.848733序号稀释度（1：100）稀释度（1：1000）取对数后可得5.9×10≤X≤7.1×102.2.3菌落总数的不确定度报告1

6、54533被测样品菌落总数在5.9×10和7.1×10之间。2596菌落总数值为：339710样液：（6.5±0.6）×10cfu/ml47173　小结3.1目前，国际上统一使用的检测和校准实验能力的通用要求是ISO/IEC17025-2005，在内容和技术要求方面5555[3]强化了评定测量不确定度要求，由于微生物测量结果的特殊性，所以其测量结果的不确定度表示也与其他专业6808不同；[4]75953.2如果在空白试验中发现有菌落生长情况，则认为实验条件不符合规定要求，所以实验应重新进行，如继续评定不确定度，则评定无效；87373.3在识别不确定度来源后，

7、对不确定度各个分量作一个预估算是必要的，对那些比最大分量的三分之一还9767小的分量可不必评估[5]，除非分量较多。本实验重复性测量结果占的分量最大，其他分量小于三分之一，且数量平均值697不多，所以其他分量均未评估。同一稀释度重复测量9次，结果选取菌落总数在30～300之间的平板作为菌落总数的测定数据。本实验取稀参考文献：释度为（1：100）作为计数数据。[1]李玉玲.宋莉莉.食品微生物菌落总数检验中不确定度的评定[J].中国卫生检验杂志，2005，15（7）：880，2.2不确定度的评定896；由于重复测量结果中的最大值和最小值相差较大，故不能用常规的标

8、准偏差的方法计算不确定的值，通常是[2]CNAS-C