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《盐酸氨溴索对百草枯中毒大鼠肺sp—d表达和肺损伤保护作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、盐酸氨澳索对百草枯中毒大鼠肺SP—D表达和肺损伤保护作用【摘要】目的观察盐酸氨澳索对百草枯中毒致急性肺损伤大鼠肺表面活性物质蛋白-D（alveolarsurfaceactivesubstance-D,SP-D）及各相关指标的影响，并评价盐酸氨澳索对百草枯中毒治疗作用。方法将120只雄性大鼠，随机（随机数字法）分为3组：生理盐水组（NS组），百草枯中毒组（PQ组），盐酸氨澳索治疗组（AT组）；再分别将每组按时间点（第1、3、5、7天）随机（随机数字法）分为4组。各组以Westernblot法检测肺组织S
2、P-D蛋白含量，以HE染色观察大鼠肺组织形态学变化，并同时检测各组大鼠的白细胞计数（whitebloodcount,WBC）和中性粒细胞（po1ymorphonuc1ear,PMN）百分比及动脉血氧分压（arterialoxygenpressure,Pa02）o结果AT组第3、5、7天WBC计数均低于PQ组，高于NS组各相应时间点，差异有统计学意义（P[Keywords]Paraquat；Acutelunginjury/acuterespiratorydistresssyndrome；Alveolar
3、surfaceactivesubstance-D；Ambroxolhydrochloride百草枯（paraquat,PQ）为中等毒性速效季胺盐类除草剂，在我国农村广泛使用，但其对人体毒性极大，且无特效解毒药，病死率高达60.0%〜81.6%[1-2]。百草枯可经皮肤、呼吸道、消化道吸收，口服后吸收快，吸收后通过血液循环几乎分布于所有的组织器官，但主要蓄积在肺，导致急性肺损伤，晚期可发生肺泡内和肺间质纤维化，会导致难以治疗的呼吸衰竭，继而发生多器官功能障碍综合征及多器官衰竭而致患者死亡。因此，在百草枯
4、中毒的早期是否能有效的治疗和逆转急性肺损伤(Acutelunginjury,ALI),是抢救的关键。盐酸氨澳索(ambroxolhydrochloride)是漠乙新的代谢产物，因具有祛痰并抑制支气管炎症作用3而成为一种新型治疗呼吸系统疾病的新型药物。本课题组研究发现给予百草枯中毒所致急性肺损伤大鼠大剂量盐酸氨漠索后，大鼠肺损伤减轻，这可能与盐酸氨澳索促进SP-A分泌有关4。研究发现肺表面活性物质相关蛋白-D(alveolarsurfaceactivesubstance-D,SP-D)在急性肺损伤中起着
5、极为重要作用。因此，笔者拟通过腹腔注射百草枯，建立急性肺损伤大鼠模型，进而观察盐酸氨漠索对百草枯中毒致急性肺损伤SP-D的影响，并评价盐酸氨澳索对百草枯中毒治疗作用，为今后临床应用提供理论依据。1材料与方法1.1主要试剂与药品20%百草枯，先正达生物科技(中国)有限公司；盐酸氨澳索注射液，德国勃林格殷格翰公司；Ghrelin一抗(山羊来源多抗)SantaCruz,美国；二抗(兔抗山羊)，北京中山金桥生物技术有限公司，中国。1.2实验动物分组与处理清洁级健康成年雄性SD大鼠120只，体质量200〜250
6、g,购自河北医科大学实验动物中心，实验动物合格证明书编号为：1203095c将SD大鼠饲养于SPF级实验室，一周后将120只SD大鼠随机（随机数字法）分为三个实验组：（1）生理盐水组（NS组，n=24）,每日腹腔注射6ml/kg0.9%生理盐水；（2）百草枯中毒组（PQ组，n=48）,以30mg/kg腹腔注射0.5%百草枯稀释液（抽取20%百草枯1ml,用0.9%生理盐水稀释为40ml,即为0.5%百草枯稀释液，每毫升稀释液含百草枯5mg）,建立大鼠百草枯中毒模型；（3）盐酸氨漠索治疗组（AT组，n=
7、48）,百草枯注射后每日腹腔注射含盐酸氨漠索（35mg/kg）等容量生理盐水。三组再分别按时间点（第1、3、5、7天）随机（随机数字法）分为4个小组,PQ组、AT组每小组均为12只，NS组每小组为6只。1.3血液标本的采集以3%戊巴比妥钠（40mg/kg）腹腔注射麻醉大鼠，麻醉成功后，将其置于手术台上（仰卧位），并固定。用碘伏消毒腹部皮肤，沿腹部正中线剪开腹壁，暴露腹腔，分离股动、静脉。无菌注射器抽取股静脉血2ml,注入抗凝血采血管1ml并充分摇匀，同时以毛细采血管采血20u1,以检测白细胞计数（wh
8、itebloodcount,WBC）和中性粒细胞(polymorphonuclear,PMN)百分比。无菌血气针抽取股动脉血lml,并迅速将针尖插入橡皮塞内达密封状态，充分摇匀后测定动脉血氧分压(arterialoxygenpressure,Pa02)o1.4肺组织标本采集血液标本采集的同时，取出左、右肺组织，并用4°C生理盐水冲洗，左肺置于4%多聚甲醛固定液中固定24h后，制备石蜡切片，行HE染色观察肺组织形态学变化。右肺置于-80°C冰箱冰冻保存，通
