2013浙科版选修1第一部分《实验二 微生物的培养和利用》word素材2.doc

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1、高中生物实验2分离以尿素为氮源的微生物浙科版核心解读HEXINJIEDU1．尿素在自然界中氮循环有怎样的关系？自然界中的氮循环在保持生态稳态上有重要的作用，具体过程可参看下图。自然界中的氮循环如果土壤中有许多尿素，在自然界较高温度下就会被水解，水解后的NH3会使土壤变成碱性，NH3与其他阴离子物质如SO、CO、NO等形成化合物，则会使土壤板结。有脲酶的细菌使植物废弃物和动物尸体降解，并利用了所形成的氨，有利于自然界中氮的循环。2．为什么本实验中要用琼脂糖来代替琼脂配制固体培养基呢？琼脂糖与琼脂有何区别？琼脂在制作固体培养基时起凝固剂的作用。但它却是一种未被纯化的混合物，里面有

2、一定量的含氮化合物。在本实验中所使用的尿素培养基却要求提供氮元素的物质只有尿素，用这种培养基才能分离得到含脲酶的细菌。若用琼脂来制备本实验的尿素固体培养基，则提供氮元素的物质除了尿素还有琼脂，用这种培养基就不难只得到含脲酶的细菌，还会得到大量以非尿素为氮源的细菌，这样就达不到分离出以尿素为氮源的细菌这一实验目的了。所以要将琼脂纯化，去除那些含氮化合物，这样经纯化得到的琼脂糖就可以代替琼脂做固体剂且不会带来含氮化合物对本实验的干扰了。3．本实验的微生物分离与上一实验中大肠杆菌的分离实质上一样吗？两者的细菌分离有很大的不同。[来源:学,科,网]实验名称分离方法分离的内容分离结果实

3、验1：大肠杆菌培养和分离划线分离法从同种菌种中分离得到同种菌的单菌落在划线的末端出现大肠杆菌单菌落实验2：分离以尿素为氮源的微生物涂布分离法只出现含有脲酶的细菌菌落从土壤浸出液里所存在的各种细菌中只将含有脲酶的细菌分离出来[来源:学科网ZXXK]4.如何区分已经从土壤中分离得到了有脲酶的细菌菌落？这样区分的原理是什么？若在尿素培养基上出现了菌落，则表明已经分离得到有脲酶的细菌菌落了。得出这一结论的依据是：尿素培养基中提供氮源的只有尿素，在这样的培养基中能存活的细菌则能利用尿素做氮源，它们就是有脲酶的细菌。5．全营养培养基与尿素培养基上的菌落在数量和类型上有什么不同呢？为什么出

4、现这种差异呢？　　　　　　LB培养基稀释度10－4　尿素培养基稀释度10－4比较上图，可明显发现：全营养培养基数量和种类都明显多于尿素培养基上的。因为全营养培养基中的氮源是蛋白胨，很多细菌都能利用它，而尿素培养基中的氮源只有尿素，只有含脲酶的细菌才能利用尿素，能存活。[来源:学科网ZXXK]6．全营养培养基与尿素培养基属于什么类型的培养基呢？微生物的培养基是怎么分类的？全营养培养基属于基础培养基，而尿素培养基属于选择培养基。培养基名目繁多，种类各异，为了便于系统化，可对其进行分类。(1)按对培养基成分的了解程度分：①天然培养基：利用一些天然材料制成的培养基，对其成分无法确定。

5、具体材料：如用肉汤、芽汁等制成的。用途：适合作实验室用的基本培养基及大生产中的种子培养基。②组合培养基(合成培养基、化学限定培养基或综合培养基)：是用化学成分及其数量都很清楚的物质配制的培养基。用途：一般用作营养、代谢、生理、生化、遗传、育种、菌种鉴定和生物测定等较高的研究工作。(2)按物理状态分：①固体培养基：外观呈固态的培养基。[来源:学。科。网]用途：广泛，可用于菌种的分离、鉴定、菌落计数等。可用于菌种保藏、生物活性物质测定等。②半固体培养基：在液体培养基内加入少量琼脂(0.5%左右)，当培养基倒放时会流动。用途：细菌运动观察(穿刺接种)噬菌种的效价；厌氧菌的培养及菌种

6、保藏。③液体培养基：不加入凝固剂呈液体状态的培养基。用途：广泛，在实验室中作各种生理、代谢研究和获得大量菌体，生产上绝大多数用液体培养基。(3)按培养基的用途分：①基础培养基：含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基。如：牛肉膏蛋白胨培养基是培养细菌的基础培养基。②选择性培养基：根据某种微生物的特殊营养要求或对某些化学、物理因素的抗性而设计的培养基。它的目的是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率。③加富培养基：在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。如加入血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等。一般是用来培养营养要求苛刻的微生物。

7、一定意义上有选择的作用。它可以增加所要分离微生物的数量，达到富集，从而形成优势，淘汰其他菌种。④鉴别培养基：是在培养基中加入某种特殊化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可与培养基中的特殊化学物质发生反应，产生明显的变化，这样可将该种微生物与其他微生物区分开来。题例领悟TILILINGWU【例题1】在细菌分解尿素的化学反应中，生成物是(　　)A．N2　　B．NOC．NOD．NH3解析：以尿素为氮源的微生物，这些细菌中含有脲酶，它能降解尿素为NH3，为其生长提供氮源。答案：