青霉发酵产α.半乳糖苷酶的.研究

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1、浙江大学硕士学位论文露聚糖，这里只含很少的D．半乳糖残基，而在象牙实(ivorynut)中的甘嚣蜜A(mannanA)和甘露蜜B(mannanB)，其中D-甘露糖：D-半乳糖分别为50：1和90：1。植物的半乳甘露聚糖，主要存在于豆科种子。据E．Anderson(1949)检测163种豆科种子，有119种含胚乳粘胶多糖，其中13种已鉴定是半乳甘露聚糖。迄今已证实70种豆科种子的半乳甘露聚糖，除少数外都存在于种子胚乳中(例如大豆的半乳甘露聚糖存在于种子英里)。按照1959年Aspinall提出的定义，D．半乳糖含量在5％以上的甘露聚糖称为真正半乳甘露聚糖(trueg

2、alactomannans)，已经在番荔枝科(Annonaceae)、旋花科(Convolvulaceae)和棕榈科的成员中得到。豆科种子的半乳甘露聚糖，一般是以多糖形式贮存，在种子萌发时，豆科种子中的粘胶含量下降也说明这一点。虽然在种子成熟过程，半乳甘露聚糖的水平稳定地提高，达到最大值再慢慢地下降，其单糖组分比例则保持不变。据研究，在萌发的植物种子中，半乳甘露聚糖的降解，最少要有三种酶系参与作用：一是n．D．半乳糖苷酶，解除(1—6)．a．D．半乳糖侧链；二是B．D．甘露聚糖酶，分裂(1—4)8．D．甘露聚糖骨架链成为寡糖；三是13-D．甘露糖苷酶，完全水解D．

3、甘露寡糖成为D．甘露糖。种子胚乳半乳甘露聚糖的基本结构样式，与作为半纤维素的细胞壁半乳葡萄甘露聚糖有相似之处，后者由B-D．(1—4)．键合的D．甘露糖基和D-葡萄糖基组成主链，在0-6上有时被单个n．D．半乳糖基取代。这里的D．甘露糖与D．葡萄糖之比常常也是3：I，而所含的D．半乳糖残基少则难溶于水，只溶于碱性水溶液，表明D．甘露聚糖骨架上取代D．半乳糖分支数，与多糖水溶性间存在的关系。已知刺槐豆树胶中D．半乳糖侧链的含量，在冷水可溶级分中很高，而在热水可溶级分中则很低，而在不溶性级分中所含D-半乳糖则非常少。这种溶解度与侧链含量间的关系，可以归结于相邻的多糖链

4、间存在很强的非共价键合相互作用。例如，刺槐豆树胶可以作为促进剂使直链淀粉从溶液中沉淀，可能由于它的主链上D．半乳糖分支很稀少，对多糖链间非共价键合相互作用防碍不大，而纠耳树胶含较多的D．半乳糖侧链，就没有象刺槐豆那样的作用。塑婆盔堂亟圭堂焦迨塞1．2微生物n一半乳糖苷酶的研究进展d．半乳糖苷酶(EC3．2．1．22，Q．D．galactosidase)，最初是由酵母底面发酵液提制出来的，加水可以分解蜜二糖而称之为蜜二糖酶．通过对各种碳水化合物为基质的蜜二糖酶特性的研究，发现以具有n．D．半乳糖苷结构的碳水化合物为该酶的主要作用对象，因此蜜二糖酶被命名为a-半乳糖苷

5、酶。CI．半乳糖苷酶能水解含半乳糖的低聚糖、半乳糖苷聚糖，半乳糖脂等中的非还原性末端中的a．D．半乳糖苷。它们广泛存在于微生物、植物、动物中。不同来源的a．D．半乳糖苷酶的纯化特性已有很多报道，它们的特性相差明显。以植物(咖啡、紫花苜蓿、车前草、蚕豆、西瓜)取材的Q-D．半乳糖苷酶研究的比较详细。在各种哺乳动物组织的匀浆中存在a·D-半乳糖苷酶，猪肾的半乳糖苷酶是与颗粒部分相连接。人和鼠的甲状腺、肾脏和脾脏的酶活性最高。由微生物生产a．D．半乳糖苷酶，易得，而且产量也极高。国外从60年代即开始从微生物中筛选产a．半乳糖苷酶的菌种，并对a．半乳糖苷酶进行纯化及性质的

6、研究；我国于70年代后期开始进行微生物产a．半乳糖苷酶及酶性质的研究。现已筛选出不少产a-半乳糖苷酶活性高的微生物，并进行了广泛深入的研究，尤其在酶制剂的制备和食品工业的应用方面，已取得很大进展。n．半乳糖苷酶在食品、饲料及医药工业各方面都具有很重要的应用价值。在甜菜制糖工业中，糖蜜中的棉子糖经a一半乳糖苷酶分解，不仅能提高产率，还能提高效率，此外a．半乳糖苷酶还应用于大豆及其他豆类的加工，因棉子糖和水苏糖这类低聚糖的存在，阻碍了豆类蛋白的利用。在以豆饼为日粮的饲料加入a．半乳糖苷酶和其它酶协同作用，可有效提高饲料的利用率。除此外，在医疗上和多糖树胶的改性上有着广

7、泛的作用。铃木等从土壤中筛选出三株只产生n．半乳糖苷酶的放线菌和一株产n一半乳糖苷酶还产生少许转化酶的被孢霉。将后者制成含n．半乳糖苷酶的固定化菌体，能连续使用多次，分解棉子糖的活力高，应用在甜菜制糖工业中，可使甜菜废糖蜜中所含6％一10％的棉子糖水解76％--87％，分解生成的蔗糖和废糖蜜中原来所含的蔗糖均能提取出来，使蔗糖的产率提高3％—-4％。因此，这种工艺称为“无废糖蜜制糖法”。4塑婆盔堂亟主堂焦迨塞1．2．1产Ⅱ一半乳糖苷酶的微生物很多微生物能产n．半乳糖苷酶。很早就发现酵母菌、乳杆菌和曲霉的一些种能产生a．半乳糖苷酶。以后又相继发现了较多的细菌，如假单

8、孢杆菌、产