【硕士论文】医院常见致病菌耐药谱及耐药菌同源性分析.pdf

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1、兰州大学硕士学位论文医院常见致病菌耐药谱及耐药菌同源性分析摘要目的了解医院常见耐药菌分布状况，追踪由质粒介导的耐药菌在医院病区传播途径及其耐药谱，探讨细菌耐药性的传播机制及不同来源耐药菌的同源性，为预防和控制院内感染提供依据。方法以兰州市两所医院的五个不同科室为采样点，分别采取病人床单、医护人员手、空气等标本，采用细菌常规鉴定方法进行致病菌的鉴定，从医院病房采集标本中筛选金黄色葡萄球菌及大肠杆菌，并借助药敏实验、质粒消除及转化实验、质粒图谱、限制性内切酶图谱等技术对两种菌进行耐药性及质粒同源性分析。结果从两家省级医院五个科室共采集196份标本，分离病原菌38

2、0株，其中革兰氏阳性菌195株，占51．3％，革兰氏阴性菌185株，占48．7％，其中大肠杆菌25株，金葡菌15株，分离率分别为12．8％、7．7％。药敏结果显示，病房分离的25株大肠杆菌对所用的8种抗生索耐药，耐药率达76．0％，28．0％的菌株对一种抗生素耐药，32．0％的菌株对三种及三种以上抗生素耐药。临床分离菌株中，除1株对两种抗生素具有耐药性以外，其余菌株对三种及三种以上抗生素具有耐药性，其多重耐药率达91．7％。15株金葡菌中86．7％的菌株对除头孢西丁、头孢唑啉、头孢三嗪、万古霉素外的其它7种抗生素呈不同程度的耐药，耐药率达6．7％～60．0％

3、，耐药率最高的为青霉素，最低的为庆大霉素，46．7％的菌株对三种及三种以上抗生素耐药，只有2株菌对一种抗生素耐药。在25株大肠杆菌中19株检出质粒，检出率为76．0％，所有菌株均携带24．8kb大小的质粒，提示该质粒是医院致病性大肠杆菌的流行质粒。12株临床分离大肠杆菌均携带质粒，共检出60个质粒，较病房分离株所携带的质粒大，大部分在10．Okb之上，83．3％的菌株含有五种及五种以上质粒。本次分离的15株金葡菌中12株含有质粒，其携带率为66．7％，检出质粒的菌株均带有约38kb大质粒，最多的l株菌带有11种质粒。对13株携带耐药质粒的大肠杆菌病房分离株进

4、行质粒消除，除1株菌的耐药性始终未发生变化外，其余12株的耐药性有不同程度地改变，其中7株耐药性全部消失，5株仅有部分改变；12株临床分离株经质粒消除后，除2株菌的酬药性始终未变外，其余10株耐药谱发生显著变化。对11株含有耐药质粒的金葡菌进行质粒消除后发现，除2株菌的酬南通男科医院http://www.ntnkyy.com/兰州大学硕士学位论文药性始终未发生变化外，其余9株其耐药谱有显著变化，其中3株菌耐药性全部消失，而其余6株仅有部分耐药性发生改变。对大小相同的大肠杆菌耐药质粒经EcoRI酶切后发现，同一科室大肠杆菌携带的耐药质粒含有相同DNA片段，不同

5、科室菌株酶切图谱也相似，表明相同科室及不同科室均有同源性大肠杆菌存在。对同一医院相同科室的4株耐药金葡菌酶切后发现，3株菌均切到21．5kb片段，且其中2株同时切出7．7kb、15．3kb、21．5kb三个大小相同的DNA片段，表明相同医院同一科室有同源性金葡菌存在。结论从金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的科室分布特点可知，医院病房存在医护人员一医疗器械一病人一物表一陪护人员间的交叉感染，各病房耐药菌株通过耐药质粒的传递，从而造成同源性耐药菌在各科室的传播流行。因此，医院应及时采取相应措施，以有效控制，，／耐药菌在医院的播散，防止院内感染暴发流行。关键词金黄色葡萄球

6、菌，大肠杆菌，医院感染，耐药质粒，同源性，药敏实验质粒图谱II南通男科医院http://www.ntnkyy.com/兰州大学硕士学位论文ResearchonBothAntibiogramandHomologyoftheAntibioticResistanceofStaph)’lococcusAureusandEscherichiaconinHospitalABSTRACT0协ectiveTounderstandthedistributionandtheepidemicconditionofantibioticresistantbacteriainhospi

7、tal，totraceaboutspreadingwaysleadedbyplasmidsinhospitalcares，andtodiscussthehomologyofresistantbacteriaandtheinfectionapproachofdifferentresistantpathogensothatCallprovideevidenceforthecontrolofnosocomialinfection．MethodsSpecimenswerecollectedfromdoctor’sandnurse’shands，patientshee

8、tsandairoffivesectionoffic