GBT8381.6-2005-配合饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定薄层色谱法.pdf

《GBT8381.6-2005-配合饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定薄层色谱法.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、ICS65.120B20(,G8中华人民共和国国家标准GB/T8381.6-2005配合饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定薄层色谱法Methodfordeterminationofdeoxynivalenolinformulafeed-Thinlayerchromatography2005-09-05发布2006-02-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布中国国家标准化管理委员会GB/T8381.6-2005NO舌本标准参考了GB/T14929.5-1994(谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定方法

2、》。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准由农业部饲料质量监督检验测试中心(沈阳)负责起草，吉林省兽药监察所、国家饲料质量监督检验中心(北京)参加起草。本标准主要起草人:陈莹莹、曹东、董永亮、肖勇、李雪兰、李广生、刘同民、杨曙明。GB/T8381.6-2005配合饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定薄层色谱法范围本标准规定了测定配合饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的薄层色谱方法。本标准适用于配合饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定。本方法的检出限为lmg/kg,2规范性引用文件下列文件中

3、的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T14699.1饲料采样原理配合饲料中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇经提取、净化、浓缩和硅胶G薄层板展开后，加热薄层板。由于在制备薄层板时加人了三氯化铝，使脱氧雪腐镰刀菌烯醇在365nm紫外灯下显蓝色荧光，根据其在薄层板上显示荧光的最低检出量来测定含量。4试荆除非另有说明，在

4、本分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水(或去离子水，或相当纯度的水)4.1脱氧雪腐镰刀菌烯醇(以下简称DON)标准品，SIGMAD0156".4.2乙酸乙醋。4.3石油醚，沸程60'C^-900C,300C-60'Ce4.4乙醚。4.5氯化铝(AIC1,·61420).4.6硅胶G，薄层层析用。4.7乙酸乙醋一甲醇,19+104.8三氯甲烷一无水乙醇，8+204.9甲醇一水，4十1.4.10甲醇一丙酮,1+2a4.11三氯甲烷一乙睛,4+1.4.12甲苯一乙酸乙醋一甲酸,6+3+1,4.13中性氧化铝，层析用

5、，经300℃活化4h，置干燥器中备用。4.14活性炭:取20g活性炭，用27(体积分数)盐酸溶液浸泡过夜、抽滤后，用热蒸馏水洗至无氯离子，在120℃烘干备用。1)D0156是美国Sigma公司的商品代号。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品GB/T8381.6-20054.15DON标准品溶液:称取5.0mgDON标准品，准确到。.1mg，用乙酸乙醋一甲醇(4.7)溶解，转人10mL容量瓶中，再用乙酸乙醋一甲醇稀释至刻度，此溶液含DO

6、N0.5mg/mL。吸取此标准溶液0.5m工，用乙酸乙醋一甲醇稀释至10mL，此溶液含DON25ug/mL,5仪器和设备5.1分析天平:感量。0001g.5.2天平:感量。.01g.5.3小型粉碎机。5.4电动震荡器。5.5旋转蒸发器。5.6层析柱:内径2cm，长10cmo5.7刻度吸管:容量10mI,,25mL5.8具塞浓缩瓶:容量10m工，底部具。.2ml，刻度尾管。5.9玻璃板:规格5cmX20cm5.10薄层涂布器:涂布厚度。.3mm.5.11展开槽:卧式，内长25cm，宽6cm，高4cm;立式，内长1

7、0cm，宽6cm，高25cm.5.12紫外光灯:波长365nm,5.13微量注射器:lOpL,25pLo6试样的制备将按GB/T14699.1取得的样品，四分法缩分，取约200g，经粉碎，全部过1mm孔筛，混匀，装人磨口瓶中备用。7测定步骤7.1提取称取20g试样(6)，精确到0.01g，置200m工具塞锥形瓶中，加8ml水和100mL三氯甲烷一无水乙醇(4.8)，密塞，在瓶塞上涂层水，盖严防漏。振荡1h，通过折叠快速定性滤纸过滤，取25mL滤液于100m工蒸发瓶中，置旋转蒸发器(5.5)上450C减压蒸发至干

8、。7.2净化7.2.1液一液分配用100MI_石油醚(4.3)分次溶解蒸发瓶中的残渣，洗人250mL分液漏斗中，再用30mL甲醇一水(4.9)分次洗涤蒸发瓶，转人同一分液漏斗。振摇分液漏斗1.5min，静置约15min，使分层后，将下层甲醇一水提取液过净化柱，不要将两交界处的白色絮物放人柱内。7.2.2柱净化在层析柱(5.6)下端塞约0.1g脱脂棉，尽量塞紧，先装入。.5g中性氧化铝(