脱氧雪腐镰刀菌烯醇检测方法的建立.pdf

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3、标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大而使一工机位过材料。对或或证与的研究其它教构的书用的我同作同事本学育学田论文的致谢了确的说示。所做的任何贡献均在中作明明并表了谢意３＾日名；／＾批究生签：＜时年月研气间為）｜據｜生导指导究学文的承诺师研位论人承诺：的业位硕去研究生＾所呈交的硕去位论文本我专学学是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，属于我现岗职务王作的结果，并格按照校《关于规范西北农林科技大研生

4、术道德的行规定》严学学究学暂而获如关北技大生道的研结果。果违反校《于规范西农林科究术德得究学学研学的行规定》，愿接受按校关规定处罚处理承担相应师连任。暫我学有的并导带责－之若Ｊ曰签时间：月导师：年Classificationcode:S851.34+7Universitycode:10712UDC:614.3Postgraduatenumber:2014050748Confidentialitylevel:PublicThesisforMaster’sDegreeNorthwestA＆FUni

5、versityin2016EstablishmentofdetectionmethodofDeoxynivalenolMajor:MasterofVeterinaryResearchfield:ClinicalVeterinaryMedicineNameofPostgraduate:XiaonanLiAdviser:Associateprofessor.QiangDongDateofsubmission:May2016YanglingShaanxiChina脱氧雪腐镰刀菌烯醇检测方法的建立摘要畜产品安全是目前养

6、殖业关注的一个热点，把控好畜产品安全的每一关都至关重要。霉菌毒素对动物和人类的健康构成了巨大威胁。脱氧雪腐镰刀菌烯醇又名呕吐毒素，其被认为是谷物或饲料中常见的最危险的霉菌毒素之一，并且在全球范围内呕吐毒素污染谷物和饲料的状况最为常见，形势较为严峻。该毒素可引起急性、慢性、细胞性以及生殖毒性，对动物和人的健康造成很大威胁。且目前市场上常用的检测法，如胶体金快速检测试纸条、ELISA检测试剂盒质量参差不齐，急需改进并寻求新的检测法应用于临床。本文研究建立了两种方法用于脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素的残留检测，并在基础上完成

7、了试剂盒的制备，为饲粮中呕吐毒素的检测提供了依据。两种呕吐毒素残留检测的方法，分别为酶联免疫检测法和化学发光酶免检测法。首先对各反应条件进行了优化：1、通过棋盘法确定了抗原抗体的最适工作比例；2、对两种检测法的缓冲体系与反应模式进行优化，确立了各种反应条件与模式；3、通过以上条件的筛选最终建立合适的标准曲线，确定了最低检测限；4、对以上建立的方法做添加回收实验，筛选合适的回收方法；5、对两种检测法的各种性能指标进行检测，包括准确性、精密性、稳定性以及是否存在交叉反应等，如有必要再对之前的各条件进行优化，最终建立

8、一个完整的检测呕吐毒素的间接竞争检测方法。经过优化后，最终确定呕吐毒素酶免检测试剂盒的检测限(IC15)为10ppb，线性范围为10-810ppb，试剂盒的检测灵敏度为60.9ppb；做12种样品的添加回收实验，回收率在88.7%-116.3%，批内变异在2.14%-9.97%，批间差异最高为10.82%，且试剂盒的稳定性很好，整体变幅在30%以内。呕吐毒素化学发光酶免疫检测方法的检测