葛根素抗心律失常机制分析

《葛根素抗心律失常机制分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯103葛根素抗心律失常机制研究中文摘要目的：从电生理角度观察葛根素对单个心室肌细胞动作电位的影响，以及对HEK293细胞上表达的KCNQl(KvLQTl)、KCNQl／KCNEl(k。)、KCNJ2(Kir2．1)和KCNJ4(Kir2．3)通道电流的影响，探讨葛根素抗心律失常的作用机制。方法：急性分离大鼠心脏，使用Langendoff系统经主动脉逆向灌流，胶原酶II酶解获得单个-tl,室肌细胞，采用全细胞膜片钳记录技术观察不同浓度(0。01，0．1，lmM)葛根素对大鼠心室肌细胞动作电位的影响：培养HEK29

2、3细胞，分别用脂质体瞬时转染pcDNA3．1．KCNQl、pcDNA3．1-KCNQl与pcDNA3．1-KCNEl、pcDNA3．1-KCNJ2、pcDNA3．1一KCNJ4质粒，于24～48h对转染后的细胞进行全细胞和内膜向外模式电生理记录，观察不同浓度(0．1～10mM)葛根素对通道电流的影响。此外，观察D受体激动剂异丙肾上腺素(100nM)、蛋白激酶A激动剂8-Br-cAMP(100gM)、腺苷酸环化酶激动剂Forskolin(10gM)、P13K通路抑制剂LY294002(10pM)以及PLC信号通路抑制剂U73122(10哗)对lmM葛根素抑制后的KvLQT

3、l通道电流的影响。结果：0．0lmM、0．1mM、lmM葛根素分别使大鼠心室肌细胞静息膜电位从(一80．1+2．7)mV变为(一78．54-4．2)mV、(一83．3+7．6)mV和(一84．7+5．1)mV(均n=6，P>O．05)；使动作电位超射幅度从(112．5+6-3)mV变为(109．8+8．5)mV、(114．2+4．9)mV和(115．94-6．2)mV(均n=6，P>0．05)：使APD90从(164．6+21．4)ms延长至(188．3+11．5)ms、(221．6+25．7)ms和(278．7+38．2)ms(均n=6，P<0．05)；使APD50从

4、(71．8士11．8)ms延长至(86．94-10．7)ms、(100．5土14．1)ms和(123．6士25．4)ms(均n=6，P<0．05)。当葛根素的浓度为0．1uM、lgM、10州、100洲、1mM和10mM时，对KvLQTl稳态电流密度抑T制率分别为(2．35+0．50)％、(5．69+2．88)％、(17．20+2．74)％、(57．71土3．45)％、(72．94土3．77)％和(75．78+2．04)％(均n=6，P

5、、(63．23+2．82)％、(75．97+1．99)％和(80．42士3．90)％(均n=6，尸

6、素的浓度为10mM、50mM、100mM和200mM时，对Kir2．1稳态电流密度抑制率分别为(28．20+2．80)％、(52．364-1．76)％、(52．42+3．07)％和(53．11+3．81)％(均n=6，P

7、；100州葛根素分别使标准化后的KvLQTl和k。单通道开放率减小(49．78+7．65)％和(54．25+8．22)％(均n=6，P