人外周血单核细胞来源的树突状细胞对γδt细胞表型与功能影响的实验的研究 (1)

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1、缩略词表Abbreviation缩略词英文全称中文全称APCantigenpresentingcell抗原提呈细胞CpGODNoligodeoxynucleotidescontainingCpGmotifs寡聚脱氧核苷酸CpG基序DCdendriticcell树突状细胞FBSfetalbovineserum胎牛血清FCMflowcymetory流式细胞术GrBgranzymeB颗粒酶BiDCimmaturaldendriticcell不成熟树突状细胞IFN-γinterferon-gamma干扰素γIL-12interleukin-12白介素12IPPisopente

2、nylpyrophosphate异戊烯焦磷酸LDHlacticaciddehydrogenase乳酸脱氢酶mDCmaturaldendriticcell成熟树突状细胞MHCmajorhistocompatibilitycomplex主要组织相容性复合体mo-DCmonocyte-deriveddendriticcell单个核细胞来源的树突状细胞NKG2Dnaturalkillerregion2D自然杀伤细胞受体2DO.Dopticaldensity光密度PAMPspathogen-associatedmolecularpatterns病原相关分子模式PBMCperip

3、heralbloodmononuclearcell外周血单个核细胞PBSphosphate-bufferedsaline磷酸盐缓冲液PRRspatternrecognitionreceptors模式识别受体TCRTcellreceptorT细胞受体TNF-αtumornecrosisfactor-alpha肿瘤坏死因子α1徐州医学院硕士学位论文论文独创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意

4、。作者签名：日期：200年月论文使用授权声明本人完全了解徐州医学院有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名：导师签名：日期：200年月56徐州医学院硕士学位论文人外周血单核细胞来源的树突状细胞对γδT细胞表型及功能影响的实验研究中文摘要目的人外周血单核细胞来源的树突状细胞（mo-DC）对γδT细胞活化表型及细胞毒功能的影响，并探讨可能的机制。方法第一部分：γδT细胞与iDC或mDC按不同细胞比混合培养

5、，设γδT+iDC组、γδT+mDC组，并设mDC组和γδT组对照，48h后流式细胞术（flowcytometory,FCM）检测各组γδT细胞CD69和DC细胞HLA-DR、CD40、CD86、CD80、CD11c、CD83、CCR7的表达；ELISA法检测γδT∶DC=1时各组上清细胞因子IL-12p70、IFN-γ、TNF-α的含量。第二部分：γδT细胞和iDC细胞1∶1混合共培养，设γδT+iDC组、Transwell组（上室为γδT，下室为iDC)、CD86抗体组、TNF-α抗体组及单γδT组和单iDC组两个对照组，48h后流式细胞术检测各组γδT细胞CD6

6、9及γδT+iDC组、TNF-α抗体组及单DC组中iDC的CD86表达。第三部分：γδT细胞分别与iDC或mDC1∶1混合共培养，设γδT+iDC组、γδT+mDC组及单γδT对照组，48h后流式细胞术检测γδT细胞穿孔素（perforin）、颗粒酶B（GrB）及NKG2D的表达。乳酸脱氢酶释放法检测三组γδT细胞对SGC-7901人胃腺癌细胞株及SMMC-7721人肝癌细胞株的杀伤活性。结果第一部分：混合培养后的γδT细胞CD69表达呈现DC细胞数量依赖性上升。在细胞比为（1∶0）、（1∶0.1）、（1∶0.5）和（1∶1）时，γδT+iDC组中γδT细胞CD69分

7、别为(43.7±2.3)%、(52.4±1.8)%、(74.0±2.1)%和(90.2±2.4)%，组间差异显著（P<0.05）；γδT+mDC组中γδT细胞CD69分别为2徐州医学院硕士学位论文(43.7±2.3)%、(47.5±1.5)%、(63.0±2.7)%和(79.2±2.6)%，组间差异显著（P<0.05）；γδT+iDC组中γδT细胞CD69均高于γδT+mDC组，细胞比1∶0.5和1∶1时差异显著（二者均为P<0.05）。混合培养组中DC细胞HLA-DR、CD40、CD86、CD80、CD11c、CD83、CCR7表达上升，γδT+m