人尿脱落细胞fish检查和尿脱落细胞学检查和膀胱镜检查在尿路移行细胞癌诊断中的应用及对比的研究

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1、中文摘要人尿脱落细胞FISH检查与尿脱落细胞学检查和膀胱镜检查在尿路移行细胞癌诊断中的应用及对比研究摘要目的：尿路移行细胞癌在泌尿系肿瘤中比较常见，发病率高，复发率高，死亡率也较高，疾病的治疗占用了大量的医疗资源。而大量数据表明，越是能够获得早期的诊断治疗，预后就越好。本实验比较尿脱落细胞荧光原位杂交(FISH)检查、尿脱落细胞学检查和膀胱镜检查对以恶性血尿为主要症状的尿路移行细胞癌诊断的临床有效性，为完善血尿病因诊断提供数据支持。材料与方法：河北医科大学第二医院泌尿外科2010年8月至2011年

2、8月可疑尿路移行细胞癌的血尿患者100例，其中男性71例，女性29例，中位年龄为6l岁。对100例患者均行FISH检查、尿脱落细胞学检查和膀胱镜检查。共有72例诊断为膀胱移行细胞癌，临床病理情况：Ta10例，Tl26例，T225例，T3／4ll例。13例诊断为上尿路肿瘤，其中6例肾盂移行细胞癌，6例输尿管移行细胞癌，l例肾盂神经内分泌癌。2例诊断为膀胱腺癌。10例患者诊断为腺性膀胱炎。1例间质性膀胱炎。1例肾结核。1例前列腺癌。荧光原位杂交技术(FISH)是起源于20世纪80年代末的一种分子遗传学

3、技术，探针为已知的荧光标记的核酸，按照碱基互补配对原则，将待检标本中的未知的单链核酸与探针特异性结合，形成杂交双链核酸，再应用荧光显微镜检测荧光信号，从而得出结果。FISH可以检测染色体数目异常和染色体畸变，在分子水平表现为基因片段扩增、缺失、碱基改变等。本实验使用GLPpl6／CSPl7组合探针进行检测。通过对20例正常人(男lo例、女10例)的尿液样本，使用相同方法进行FISH实验，两组探针组合分别观察100个细胞。统计出不同类型异常细胞的百分比，建立阈值。阈值=平均值(M)+3×标准差(SD

4、)。分别建立17号染色体≥3个信号点、p16位点0个信号点、1个信号点的阈值。此阈值为本实验室前期实验确定。100t苑J患者的FISH结果与阈值相比较进行FISH判读。FISH阳性判中文摘要读标准为17号染色体、p16位点1个信号点均异常或者17号染色体的复杂异常或者p16位点0个信号点。100例患者同时行尿脱落细胞学检查和膀胱镜检查，以膀胱镜活检病理或手术切除标本病理为最终确诊依据，并对疾病进行分期，比较三种诊断方法的敏感性和特异性(尿脱落细胞学诊断为可疑按阳性结果处理)。在膀胱镜检查前取不少于

5、200ml尿液标本，否则影响细胞计数，膀胱镜活检病理结果与手术切除标本病理结果不一致时，以手术切除标本病理结果为准。结果：FISH检查、尿脱落细胞学检查及膀胱镜检查对72侈1J膀胱移行细胞癌的总的敏感性分别为62／72(86．1％)、14／72(19．1％)、67／72(93．1％)。FISH和膀胱镜比较，P=0．057>0．05，无统计学意义；FISH与尿细胞学比较P=-0<0．05，有统计学意义。尿脱落细胞学与膀胱镜比较，P=-0<0．05，有统计学意义。FISH对膀胱移行细胞癌Ta、Tl、T

6、2、T3／4各分期敏感性分别为60．O％、86．5％、94．1％、100％。尿脱落细胞学各分期敏感性分别为O％、13．5％、23．4％、62．5％。膀胱镜各分期敏感性分别为80．O％、91．9％、100％、100％。Ta、Tl、T2期，FISH与尿脱落细胞学比较，P<0．05，有统计学意义；T3／4期，P>0．05，无统计学意义。各分期FISH与膀胱镜比较，P>0．05，无统计学意义。三者对于膀胱移行细胞癌总的特异性分别为10／12(83．3％)、12／12(100％)、12／12(100％)，三

7、者比较，P=-0．314>0．05，无统计学意义。FISH检查及尿脱落细胞学检查对于12例上尿路移行细胞癌总的敏感性分别为12／12(100％)、3／12(25．O％)，进行比较，P<0．05，有统计学意义。两种检查对于整个84{歹tJ尿路移行细胞癌总的敏感性分别为74／84(88．1％)、17／84(20．2％)，两者比较，P<0．05，有统计学意义。FISH对于整个尿路移行细胞癌T。、Tl、T2、T3／4各分期敏感性分别为60．O％、86．8％、95．2％、100％。尿脱落细胞学对于各分期敏感

8、性分别为O％、15．8％、23．8％、40．O％。两种方法不同分期进行比较，均P<0．05，有统计学意义。两种方法总的特异性分别为13／16(81．3％)、16／16(100％)，P>0．05，没有统计学意义。结论：对于膀胱移行细胞癌，FISH检查的敏感性与膀胱镜检查相当，而二者明显高于尿脱落细胞学检查，三者在特异性上无明显差别。FISH和尿脱落细胞学还可以有效检测上尿路移行细胞癌，而FISH中文摘要的敏感性明显高于尿脱落细胞学。因此，对于恶性血尿为主要症状的患者，FISH可以作为