体内外人脂肪间充质干细胞向肝样细胞分化的实验研究

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1、万方数据·322·生堡墅里丛壁苤查;!!!至±旦箜!!鲞箜!塑曼墅!』旦!旦!塑塑堡!£墅堡:垒2型!!!!!∑!!:!!!堕!:!体内外人脂肪间充质干细胞向肝样细胞分化的实验研究殷莉波赵文秀尹震宇杨中萌张琼王效民【摘要】目的分离、培养入脂肪问充质干细胞(hADsCs),研究其在体内外向类肝样细胞转化的能力。方法采用I型胶原酶消化皮下脂肪,贴壁分选去除造血细胞的方法获得较纯的干细胞。通过对形态观察、表面分子鉴定、透射电镜内部结构扫描以及成脂、成骨定向诱导对脂肪间充质干细胞进行鉴定。用EGF、FG

2、F、OSM、HGF、TSA细胞因子体外诱导hADSCs向肝样细胞分化。尾静脉输注hADSCs至急性肝损伤裸鼠,观察hADSCs在裸鼠肝脏内定植、向肝样细胞分化情况,以及hADSCs对裸鼠肝损伤的保护作用。结果分离获得的细胞呈长梭形贴壁生长,低表达CD34、CD45,高表达CD73、CD90、CDl05,具有多向分化潜能。诱导细胞表现出肝样细胞形态,表达AFP、alb,并且和肝细胞一样具有吸脂性。体内诱导:移植细胞在裸鼠体内生存、分布,并且细胞表达人alb,细胞体积较裸鼠肝脏细胞大,形态不均一,与

3、人肝脏细胞形态有差异。同时研究发现hADSCs可改善急性肝损伤裸鼠肝功能,降低转氨酶。结论人脂肪间充质干细胞可在体内外向肝样细胞分化,分化的细胞具有肝细胞样生物学性状。hADSCs对裸鼠急性肝损伤具有一定的治疗作用。【关键词】脂肪;问充质干细胞;分化Experimentalstudyofhumanadiposederivedmesenchymalstemcellsdifferentiatedintohepatocyte-likeeelIsin试VOandvitroYlNLi-bo’.zHA0We

4、n-xiu。YlNZhen-yu,YANGZhong-meng,zHANGQiong,WANGXiao-min.’DepartmentofHepatobiliarySurgery,Af矗liatedXiamenZhongshanHospiral0fXiamenUniversity。Xiamen361004,P.R.ChinaCorrespondingauthor:WANGXiao-min,Email:wxm2203@z优“.edu.鲫[Abstract]0bjectiveToisolateand

5、culturehumanadiposederivedmesenchynalstemcells(hADSCs)andstudythepotentialofhADSCStOdifferentiateintohepatocyte-likecells.MethodsToensuretheremovalofcontaminatinghematopoieticcells,hADSCswereselectedbasedonplasticad—herence.CellsuHaceantigenwasconfir

6、medbyflowcytometry;ultramicrostructurewasdetectedbytransmissionelectronmicroscopy;adipogenicandosteogenicdifferentiationofhADSCswasanalyzedbyo订RedOstainingandyonKossastaining.hADSCswereexposedtOdifferentiationmediumcontai—ningEGF,FGF,0SM.HGF,TSAinvit

7、ro.10%CCh(100p1/20gbodyweight)wasinjectedintoim—mune-deficientBALB/c-numiceandhADSCs(5×105cells)weresimultaneouslyadministratedfromthetailvein.Bloodsampleswerecollectedandconcentrationofaminotransferaseanddirecthilirubinweredetected.Administrationwit

8、houthADSCswasusedasacontr01.Onemonthlater,wesacrificedthemiceandliversectionswereexaminedbyhistochemica“mmunofluorescencewithhumanALBspe-cificantibedies.ResultshADSCsexhibitedfibroblast-likemorphology,andexpressedCD73,CD90,CDl05.andwerelackingofCD34a

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