薄层色谱待打印

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1、菠菜叶绿素的分离 三、实验仪器及试剂　　仪器：载玻片；展开槽；玻璃棒；研钵　　试剂：硅胶G；95％乙醇；石油醚（60～90）；丙酮；菠菜叶 四、实验内容及步骤　　1．样品制备　　菠菜叶绿素的提取1～2片新鲜的菠菜叶剪碎放于研钵中研磨，然后加入20mL石油醚-乙醇（1：1）混合液继续研磨3分钟[1]。用移液管或滴定管将萃取液移至分液漏斗中[2]，加等体积水洗涤[3]（旋摇几下，但不可振荡以防产生乳化），分层，弃取下层水层，再加等体积水洗涤，弃取水层，将上层溶液移至干燥的小锥形瓶中，用无水硫酸镁干燥，备用。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　下一步 　　2．

2、制板　　在小烧杯中放入2g硅胶，加入50mL0.5％羧甲基纤维素钠水溶液，调成糊状，均匀倒在3块干净的载玻片上[4]（2.5cm×7.5cm）,用玻璃棒刮平，轻轻振摇，使硅胶均匀铺在载玻片上且表面光滑均匀。于室温下放置15分钟，晾干。然后放入烘箱在105～110℃活化0.5小时。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　下一步 　　3．分离与鉴定　　在活化的薄层板一端约1～1.5cm处，用铅笔轻轻划一条直线作为起点线（不要划破吸附剂层）或在薄层板边缘作一记号。用管口平整的毛细管吸取菠菜叶绿素提取液点样，斑点直径约为2～3mm。溶剂挥发后，将点样一端放入已放有高

3、约0.5cm展开剂的展开槽中[5]（展开剂为丙酮：石油醚=1：2），盖好盖，观察展开过程，当展开剂沿上行到距薄层板另一端约1cm时，立即取出，并立刻用铅笔划出展开剂前沿的位置。晾干后，仔细量下每个斑点所走的距离，计算Rf值。　　附注 　　[1]只需适当研磨，不可研得太烂而成糊状，否则会造成分离困难。 　　[2]也可用小布氏漏斗过滤，稍稍减压并用瓶子挤压固体。 　　[3]水洗的目的是洗涤乙醇及提取液中的少量水溶物。 　　[4]载玻片必须洗净，并用少量丙酮或乙醚擦拭。 　　[5]展开槽加入溶剂后，可轻轻摇动几下，使之充满溶剂蒸汽。实验7.薄层层析（甲基橙与荧光黄） 实验目的要求:了解薄

4、层层析的原理，操作和应用。实验内容：色素的薄层层析：1、硅胶薄层板的制备取洁净干燥的玻片数块，放在水平桌面上备用，称取硅胶H10克及40ml水，置于乳钵中研匀，用牛角勺涂布在玻片上，用手指抬起玻片一端，连续在桌面上轻轻拍打，使形成一均匀薄层，平放在水平玻板上，让水分自然蒸发，晾干备用。2、配展开剂：用吸量管准确量取氯仿2.00ml，甲醇0.50ml于洁净干燥的层析筒中，摇匀、密闭备用。3、点样：硅胶-H薄层板一块，用管口平整的毛细管将甲基橙、荧光黄及两者混合乙醇液分别点在起始线的三个原点上，斑点扩散直径不应超过2—3mm，放置片刻待乙醇挥干。4、展开：将点好样品的硅胶层析板放入盛有

5、展开剂的层析筒中，（注意：切勿将点样处浸没于展开剂中进行密闭展开。）（如图）当展开剂前沿扩散到距顶端1厘米左右时，取出薄层板，立即用大头针划出溶剂前沿，然后置薄层板于通风处挥干展开剂。5、计算Rf值：用直尺分别量出原点到斑点中心的距离和原点到展开剂前沿的距离，分别计算出：甲基橙、荧光黄，混合样品的Rf值，用混合样品的两个Rf值与对照品甲基橙、荧光黄比较鉴定混合样品。实验十四薄层色谱法（亚甲基蓝—荧光黄的分离）一、目的要求1．学习薄层色谱法的原理；2．掌握薄层色谱法的操作。二、基本原理薄层色谱法也叫薄层层析法。它的特点是把吸附剂均匀地铺在一块玻璃板上，铺成薄薄的一层，一般以0.5～1

6、毫米厚为宜。然后在这薄层上点好样品，将这点了样品的薄板放在盛有一定展开剂的层析缸中，层析就在这薄层上进行，故称为薄层层析法。层析法是一种有效的分离方法，它是将待分离的混合样品置于某种吸附剂（固定相）上然后让一溶剂（流动相）通过。由于混合样品中各组分在吸附剂和溶剂中的吸附、溶解能力不同即在两相中的分配不同，所以各组分在固定相上随溶剂移动的速度不同，从而达到分离的目的。薄层层析法具有操作简便，灵敏度高等优点，因此广泛应用于物质的鉴定、分离和提纯。有色物质的样品，在薄板上展开后可直接观察到它们的分离情况。但无色物质的样品，在薄层上展开以后，需要通过显色才能观察到它们的分离情况。显色方法可

7、在薄板上喷显色剂或把薄板放入密闭缸中用显色剂熏蒸，而显出有色斑点。对一些荧光物质样品，可在紫外光下照射来观察分离情况。三、仪器和试剂1．仪器：载玻片10毫升量筒50毫升烧杯250毫升烧杯表面皿研钵2．试剂硅胶G(200～400目)、0.5％CMC水溶液(羧甲基纤维素钠水溶液)0.1％亚甲基蓝水溶液、0.1%荧光黄乙醇溶液、未知液四实验步骤：1．薄板的制备称取3克硅胶G，加0.5％CMC水溶液7毫升，立即调成糊状。用拇指和食指拿玻片一端的边缘，稍倾斜，将调好的糊状硅胶G