应用ssr标记分析黄绿蜜环菌种群遗传结构

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1、QinghaiUniversityMasterDissertationGeneticStructureAnalysesofArmillarialuteo-virensPopulationsbyUsingSSRMarkersSupervisor:XieZhanLingCandidate:LiYingPaperType:BasicResearchAcademicMajor:AnimalNutritionandFeedScienceSpecificMajor:ThedevelopmentandutilizationoffeedresourcesCollege(D

2、epartment):QinghaiUniversityPapersbeginningandendingtime：2010.10—2013.3独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关

3、部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权青海大学大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于：保密□不保密□（请在相应方框内打“√”），在_____年解密后适用本授权书。学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月青海大学硕士学位论文摘要摘要黄绿蜜环菌（Armillarialuteo-virens），隶属口蘑科(Tricholomataceae)蜜环菌属[Armillaria(Fr.:Fr.)Staude]，主要分布在我国的青海、西藏等地海

4、拔3000-4500m的草原或高山草甸上，具有较高的食药用价值和生态功能，是青藏高原珍贵真菌资源宝库中典型代表种之一。本研究利用SSR分子标记方法对青海、西藏及四川的22个黄绿蜜环菌野生群体的种群遗传结构以及遗传多样性进行研究。主要研究结果如下：51、应用L16(4)正交试验设计建立并优化了黄绿蜜环菌SSR-PCR反应体系，其最适反应体系为15μL，其中包括：即在15μL反应体系中包括：1×PCRBuffer，100ng模板DNA，dNTPs217μmol/L，primer0.5μmol/L，TaqDNA聚合酶0.75U，2+Mg1.3mmol/L。反应程

5、序为：94℃5min；94℃30s，Ta℃30s，72℃1min，35个循环；72℃10min。2、应用上述优化体系对近缘物种的SSR引物进行筛选，共获得8对具有较丰富的多态性的引物，并确定了每对引物PCR扩增的最适退火温度，筛选出的8（占有效扩增的57.1%）对核心SSR引物适用于黄绿蜜环菌群体遗传学特征分析。3、本研究利用7个微卫星标记对黄绿蜜环菌个体进行遗传多样性和遗传结构分析，共检测出38个等位基因，He在0.217-0.675之间，PIC为0.4226，7对微卫星引物具有较高多态性；7个标记对22个黄绿蜜环菌种群的Nei基因多样性指数（H）范围为

6、0.265-0.465，表现出较高遗传多样性。4、聚类分析结果表明，22个黄绿蜜环菌种群可分为三个显著的地理种群，除G（刚察）种群之外，其余种群都是地理位置相近的聚在一起。黄绿蜜环菌22个种群的变异主要来源于种群间，其中ФCT=0.1924，ФSC=0.1277，种群间分化较大（ФST=0.4319），种群间基因交流受到一定限制。关键词：SSR标记，黄绿蜜环菌，遗传结构IVQinghaiUniversityMasterDissertationAbstractAbstractArmillarialuteo-virensbelongstotheTricholo

7、mataceaefamilyismainlydistributedinQinghai,Tibetatanaltitudeof3200-4800metersofthegrasslandorthealpinemeadowvegetation.Becauseitsimportantedibleandpharmaceuticalvalueandecologicalfunction,itisoneofthepreciousfungiresourcesQinghai-Tibetplateau.Inthispaper,SSRwasusedtostudygeneticst

8、ructureandgeneticdiversityof22dif