1-华中农业大学

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1、硕士学位论文课题研究内容及进展汇报课题名称高活性谷氨酸脱羧酶的筛选及固定化研究研究生姓名姚森年级2005专业食品科学研究方向食品品质控制指导教师熊善柏职称教授指导小组熊善柏杨特武赵思明食品大分子结构与功能研究室华中农业大学食品科学技术学院2006年11月制订9课题研究内容1.高活性谷氨酸脱羧酶的筛选√1.1不同品种糙米发芽后GABA的含量测定1.2糙米发芽前后谷氨酸及GABA含量的测定1.3糙米发芽后谷氨酸脱羧酶活性的测定1.4发芽糙米中GABA含量与GAD及谷氨酸含量的相关性分析2.谷氨酸脱羧酶的提取及同功酶鉴定2.1发芽糙米谷氨酸脱羧酶的提取2.2不同品种类型发芽糙米谷氨酸脱羧酶同功酶的

2、鉴定3.谷氨酸脱羧酶的固定化及性质研究3.1谷氨酸脱羧酶的固定化载体及方法的选择3.1.1固定化介质的选择3.1.2固定化方法的选择3.2谷氨酸脱羧酶的固定化条件的选择3.2.1固定化的酶用量、时间、温度、pH及离子强度的选择3.2.2固定化条件的正交试验3.3固定化谷氨酸脱羧酶酶学性质研究3.3.1固定化GAD的最适反应温度、最适反应pH及热稳定性3.3.2固定化GAD的稳定性、酶失活动力学及GABA生成动力学4.固定化酶的应用将制作的固定化酶制成固定化酶反应柱，用于GABA的生产，测定柱转化谷氨酸的效率及柱的半衰期。√表示已完成内容(每完成一项内容就打√)9课题研究内容调整及其原因1补充

3、：（确定底物Glu对GABA含量生成的影响）1.5低中高三类品种的糙米发芽过程中GABA、GAD酶活力及游离谷氨酸含量的变化分别测定稻米发芽0 h、8 h、16 h、24 h、32 h、40 h、48h后GABA、GAD及游离谷氨酸脱羧酶的变化。导师意见导师签字年月日9研究内容及结果工作时间2006年9月1日至2007年3月19日研究内容及结果1.1不同品种糙米发芽后GABA的含量测定内容：测定188份单株水稻糙米（包括早粳稻、早籼稻、中粳稻、中籼稻和晚粳稻等品种类型，含常规籼稻、常规粳稻、恢复系籼稻、恢复系粳稻、籼糯稻、杂交稻和一些特种稻）在30℃浸泡6 h，30℃发芽24 h后GABA的

4、含量。1.1.1不同水稻品种发芽糙米中γ-氨基丁酸含量不同品种(系)水稻品种发芽糙米中GABA的含量见表1。糙米发芽后GABA的含量平均值为56.84 mg/100g，其变异系数为21.31％。GABA生成量在65mg/100g以上的品系有46个，其中有10个品种(系)GABA的含量在78.72 mg/100g以上，生成量最大的品种58号达87.88 mg/100g，生成量最小的品种148号仅有34.62 mg/100g，不同品种之间GABA的生成量大小相差近3倍。在测定的特种稻中，红黄色米的GABA含量较低，黑褐色米和糯米的含量则相对其他类型的GABA含量高。表1不同水稻品种发芽糙米中GA

5、BA的含量(FW)编号GABA含量(mg/100g)编号GABA含量(mg/100g)编号GABA含量(mg/100g)编号GABA含量(mg/100g)编号GABA含量(mg/100g)173.463967.447759.5111536.8715360.67259.444077.357856.9811642.2115442.00346.244167.517968.6711751.2315554.82440.294280.578069.7011837.6315655.40552.334342.218166.7611948.8415751.34637.804447.758264.6712052

6、.8715834.96755.824551.038357.8012154.1115958.35837.634667.038457.5212285.2216064.43960.574754.318575.3712382.6216166.411053.704869.018651.5412478.7216247.881158.624964.368777.35○12546.1116365.591255.855061.088878.98○12655.5416450.691362.585177.978978.93○12772.7016567.751476.815258.219043.78△12851.3

7、016663.341561.355376.409161.90○12950.2116774.621658.625466.769239.40△13036.4616851.851740.635561.979363.13○□13157.4716987.611853.295672.509478.03○□13267.9517063.271944.675757.399573.36○□13365.5317151.372039