急性髓细胞白血病中鞘糖脂的表达及其功能研究

《急性髓细胞白血病中鞘糖脂的表达及其功能研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名：王缝一日期：到2≈参苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科

2、学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在——年一月解密后适用本规定。非涉密论文回论文作者签名：至鱼日导师签名：秀墨拓期：矽位．红∥期：沙／≯．夕．多急性髓细胞白血病中鞘糖脂的表达及其功能研究中文摘要第一章急性髓细胞白血病患者骨髓样本中鞘糖脂Lc3的表达目的：研究人骨髓样本中的主要种类鞘糖脂的表达谱，对比急性髓细胞白血病患者骨髓样本与正常对照骨髓样本中鞘糖脂的差异，寻找与急性

3、髓细胞白血病相关的特征鞘糖脂，进而研究其生物学功能及在急性髓细胞白血病中的作用。方法：(1)采用有机溶剂超声波提取的方法提取急性髓细胞白血病患者骨髓样本和正常对照骨髓样本中的鞘糖脂；(2)将提取所得鞘糖脂进行甲基化修饰反应，使其具有较高的质谱响应以便更好的进行质谱分析；(3)对所得甲基化鞘糖脂进行质谱定性分析，确定各主要鞘糖脂的种类及具体结构，对比急性髓细胞白血病患者与正常对照骨髓样本中鞘糖脂的结构差异；(4)对所有骨髓样本中鞘糖脂进行相对定量质谱分析：等量混合氘代甲基化的急性髓细胞白血病患者骨髓样本鞘糖脂和正常甲基化的正常对照骨髓样本鞘糖脂，发现鞘糖脂lactosylceramide(L

4、acCer)的含量在急性髓细胞白血病患者骨髓样本与正常对照骨髓样本中的表达水平是基本恒定的，以此为内参，进行其他种类鞘糖脂的相对定量分析，对比急性髓细胞白血病患者骨髓样本与正常对照骨髓样本中鞘糖脂表达水平的差异。结果：(1)通过多级质谱检测技术对各种鞘糖脂进行定性分析，发现在急性髓细胞白血病患者骨髓样本和正常对照骨髓样本中，都主要含有LacCer，globotrihexosylceramide(Gb3)，lactotriaosylceramide(Lc3)和GM3四种鞘糖脂，而作为同分异构体的globotetraglycosylceramide(Gb4)和neolactotetraosyl

5、ceramide(nLc4)，前者主要存在于正常对照骨髓样本中，后者则主要存在于急性髓细胞白血病患者骨髓样本中；(2)以LacCer作为内参，通过一级质谱分析对骨髓样本中的鞘糖脂进行相对定量表征，Gb3、Lc3和GM3的丰度与LacCer的丰度的比值代表Gb3、Lc3和GM3的相对量，发现Lc3和GM3在急性髓细胞白血病患者骨髓样本中的含量高于正常对照骨髓样本，而Gb3的含量无明显区别，同时，在急性髓细胞白血病患者骨髓样本中，nLc4占Gb4和nLc4混合物的比例也明显高于正中文摘要急性髓细胞白血病中鞘糖脂的表达及其功能研究常对照骨髓样本；(3)依照临床病例资料，以急性髓细胞白血病患者的不

6、同Franch-American-Britain(FAB)分型进行分析，发现骨髓样本中鞘糖脂的含量与FAB分型情况相关，Lc3的含量在M1(粒细胞未分化型)分型中明显高于正常对照骨髓样本，而在M2a(粒细胞部分分化型)分型中却没有明显差异，说明Lc3的含量可能与骨髓细胞分化情况有密切联系；(4)急性髓细胞白血病患者骨髓样本中Lc3合酶Dl，3-N-acetylglucosaminyltransferase5(133Gn-T5)的表达明显高于正常对照骨髓样本。结论：急性髓细胞白血病患者骨髓样本的鞘糖脂含量有别于正常对照骨髓样本，其中分化相关鞘糖脂Lc3的含量在急性髓细胞白血病患者骨髓样本中明

7、显高于正常对照骨髓样本。关键词：鞘糖脂；急性髓细胞白血病；质谱第二章急性髓细胞白血病中鞘糖脂Lc3的表达与细胞分化的关系目的：研究高表达的鞘糖脂Lc3与急性髓细胞白血病的关系，观察Lc3的变化与细胞分化的相互影响，探讨急性髓细胞白血病的发病以及治疗过程中鞘糖脂Lc3的潜在作用。方法：(1)对多种白血病的细胞系进行鞘糖脂的全面分析，确定HL-60和NB4为工具细胞系进行功能试验；(2)以药物aU--transretinoi