黄芩苷、槲皮素对lps致小鼠蜕膜细胞损伤的保护作用

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1、河北农业大学硕士学位论文黄芩苷、槲皮素对LPS致小鼠蜕膜细胞损伤的保护作用姓名：李云霞申请学位级别：硕士专业：临床兽医学指导教师：钟秀会20120527摘要本试验蹬在研究黄芩昔、槲皮索对LPS致蜕膜细胞损伤的保护作用。本文通过三部分实验来探讨黄芩苷、槲皮素对蜕膜细胞的保护作用及其相关机制。一、通过体外细胞培养壹观的观察两种药物的保护作用。首先对小鼠子宫蜕膜细胞的培养方法进行了改进，通过植块培养与复合酶消化的传统方法比较证实了植块培养法的优点，为下一步试验进行葵定了基础；在确定LPS对蜕膜细胞损伤作用浓度时，我们选

2、用了以下LPs的浓度l、10、50、100、500、1000ng／ml，通过观察损伤结果，100ng／mlLPS可导致50％细胞损伤故作为损伤模型浓度确定下来；黄芩营中剂量4lag／ml+LPS、槲皮素中剂量25umol／L+LPS加入细胞中与空白组和模型组对比，观察细胞的存活率，结果显示加药保护细胞存活率均比模型组高。其中槲皮素的效果较黄芩瞢的明显。二、通过体内给药造模及蠲服灌臀绘予黄芩苷及槲皮素的方法寒进行其保胎药效研究。孕6天小鼠40只随机分力8组，每组5只，第一组为空惫组，不做任傅处理，第二组为模型组(孕

3、6天尾静脉注射5lag／mlLPSO。lml／109)，第三组、第四组、第五组为黄芩瞢、离中、低治疗组(篇6天造模，第7、8天备组灌臀黄芩营0．1ml／109,浓度分别为2．5mg／ml、1．25mg／ml、0．25mg／m1)，第六组、第七组、第八组为槲皮素高、中、低治疗组(第6天造模，第7、8天各组灌胃槲皮素0．1ml／109，浓度分别为2．5mg／ml、1．25mg／ml、0．25mg／m1)，以上各组孕9天测杀，眼球取血测量衄清中TNF．征及孕酮的含量；称量子宫净重，数每组吸收胎儿个数及着床总数，计算吸收

4、率：HE染色观察子富蜕膜熬病理变化。结果显示，LPS砸致孕鬣的吸收率为3◇％；黄芩苷、槲皮素均可减少胚胎的吸收率并增加因胚胎吸收造成的重量减轻、并能修复受损的蜕膜组织；黄芩慧、槲皮素高裁量组可显著降低塞LPS刺激单核缨胞罨

5、起的炎症因子TNF一蛙表达的增矗(P<0。01)；孕酮含量各组差异不显著。三、免疫组化检测蜕膜细胞中凋亡蛋白Caspase一3的表达，我们试图从基因水平阐明自然流产与细胞异常凋亡及基因家族的关系，为探讨自然流产的机制和中药保胎的药理作用提供新认识。通过SABC免疫组化及AEC显色的方法检测空自

6、组、模型组、黄芩替中高治疗组、槲皮素中高治疗组蜕膜组织中Caspase-3的表达，计算阳性细胞数和统计分析。结果显示，LPS显著增加Caspase-3(p瑚。01)的表达，黄芩瞢、槲皮素均可有效降低蜕膜组织中Caspase-3的表达(P

7、且可能与有效降低蜕膜细胞Caspase。3的表达有关。关键词：黄芩簧；槲皮素；细菌脂多糖；蜕膜细胞；TNF—Q；孕酮；Caspase-3ProtectiveEffectsofBaicalinandQuercetinonDecidualCellsofLPSInducedAbortionMiceGraduateCalldidate：YunxiaLiAdvisor：Prof．XiuhuiZhongMajor：ClinicalVeterinaryMedicineAbstractThestudywascarriedoutt

8、ocompareabouttheeffectofbaicalinandquercetinOnprotectionofmousedeciduascellsindurcedbyLPS．Wetriedtoexporetheeffeetionandthepossiblemechanismsthroughtreepartsofexperiments．First：Usethedeciduacellcultureinvitrotoobservatetheeffectionintuitively．Firstly,weimprov

9、edthemethodofdeciduaeellculture。Weconfirmedthattheexplantcultureisbetter也allthetraditionalenzymedigestculturewhichlaidthefoundationforthenexttrials：％edifferentdosesofLPSwereaddedtotheplat