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1、黄苓昔对LPS诱导肠道损伤保护作用探究摘要目的：探讨黄苓昔对内毒素-脂多糖（LPS）引起的肠损伤的肠黏膜保护作用及黄苓昔对脓毒血症小鼠回、结肠黏膜抗氧化损伤的保护作用。方法：健康雄性BALB/c小鼠50只随机分为5组：正常对照组、模型组、黄苓昔高、中、低剂量组。分别灌胃双蒸水、黄苓昔100,50,25mg・kg-1,每日1次，连续3d,于第3天灌胃后1h,腹腔注射生理盐水或LPS（17mg・kg-1）,于腹腔注射LPS后20h处死小鼠，取回、结肠组织。观察各组小鼠生活、精神状态，记录各组小鼠死亡率，取材后测量结肠长度；光镜下根据Chiu肠黏膜
2、损伤评分方法对肠组织进行分级，以HE染色方法观察肠组织病理学变化；采用紫外分光光度法检测肠组织匀浆液总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）；免疫组化染色方法分析各组肠组织PCNA的表达。结果：小鼠腹腔注射LPS后，出现死亡现象，黄苓昔给药组死亡百分率明显低于模型组。黄苓昔中剂量组小鼠结肠长度较模型组显著增加（P2.8统计学方法采用SPSS19.0统计软件，计量资料采用t检验，等级资料采用Ridit分析，P黄苓昔是中药黄苓的主要有效成分，主要有抗菌作用［1］,抗炎作用［10］,抗氧化作用［1
3、1］等作用。故本研究通过建立LPS诱导的脓毒血症模型,从而探讨黄苓昔各剂量组对LPS引起的肠损伤的肠黏膜保护作用。罗海燕等［12］报道，采用黄苓昔高、中、低3个剂量检测黄苓昔对肠道菌群的影响，黄苓昔中、低剂量可抑制粪肠球菌的生长。本实验沿用其3个剂量给药，采用预先灌胃给予黄苓昔，对其LPS引起的内毒素血症小鼠的死亡率有明显的抑制作用，并且黄苓昔中剂量组的结肠长度较模型组有显著性的增加，均可说明黄苓昔能减轻LPS引起的肠道损伤。光镜下，模型组肠道充血、炎症细胞浸润增加，绒毛破损伴随固有层毛细血管暴露，细胞成分大量增多并有破坏和不完Si■■■AU
4、整。预先给予黄苓昔的小鼠回、结肠黏膜和固有层形态均有改善，以中剂量为主。证明黄苓昔可改善肠黏膜结构与功能,可起到保护肠黏膜作用。目前认为，肠黏膜底灌注、氧自由基损伤及细胞因子作为肠黏膜三大主要致伤因素，其中以氧化自由基损伤最为严重。由于肠黏膜内富含黄11票吟及黄11票吟氧化酶，在缺血再灌注时可催化产生大量氧化自由基，氧化生物膜，引起严重的上皮细胞损伤［13］o机体防御体系的氧化能力的强弱与健康程度存在密切联系，该防御体系有酶促体系中包括SOD,GSH-PX等，其中SOD是清除氧自由基的重要酶系，对细胞损伤具有保护作用，SOD可阻止氧化自由基链
5、式反应扩大，可以认为是生物体内氧自由基清除系统的重要防线°GSH-PX特异地催化还原型GSH对氢过氧化物的还原反应，可清除细胞内有害的过氧化物代谢产物，阻断脂质过氧化链锁反应，从而起到保护细胞膜结构和功能完整的作用［14］。本实验测得结果为黄苓昔给药组T-AOC含量均较模型组提高，且有显著性差异；进一步测得T-SOD和GSH-PX,黄苓昔中剂量组在回肠组织匀浆液中表达均有明显增加，且有显著性差异，则提示黄苓昔有保护肠上皮细胞免受氧自由基损伤的能力。综合上述，推测黄苓昔给药保护肠黏膜作用靶点在回肠，其黄苓昔中剂量作用效果较其他组显著。PCNA是
6、DNA聚合酶8的辅助蛋白，在结肠组织中PCNA表达于正处在增殖状态的细胞核，PCNA的合成与表达和细胞增殖活性密切相关［15］o对照组小鼠肠组织中PCNA表达较少，模型组其表达量显著性增加，黄苓昔各剂量组PCNA表达较模型组降低，虽无显著性差异，但是初探黄苓昔对肠上皮细胞有一定的修复作用，黄苓昔中剂量尤为显著。总之，本研究发现黄苓昔对LPS诱导的肠损伤有保护作用，能有效降低LPS引起的脓毒症所导致的死亡；黄苓昔能明显保护氧自由基清除系统，尤其表现在结肠，这可能是黄苓昔对其肠道的保护作用原因。但是，其作用机制复杂，有待进一步研究探索。［参考文献
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