黄芩苷对急性肝衰竭大鼠肝脏核转录因子--κb表达的影响

《黄芩苷对急性肝衰竭大鼠肝脏核转录因子--κb表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、温州医学院硕士学位论文黄芩苷对急性肝衰竭大鼠肝脏核转录因子--κB表达的影响姓名：陆小蒟申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：陈永平2012-05-17黄芩苷对急性肝衰竭大鼠肝脏核转录因子一KB表达的影响中文摘要目的：观察急性肝衰竭大鼠肝脏NF—KB表达水平的变化及黄芩苷对其表达的影响，探讨黄芩苷治疗急性肝衰竭的作用机制。方法：106只雄性SD大鼠，按随机数字表法随机分为三组：正常组6只、肝衰竭组50只和黄芩苷组50只，每组留10只观察生存率。肝衰竭组和黄芩苷组再按不同时间点分为24h、72h、120h、168h共4个亚组，每亚组10只。

2、肝衰竭组和黄芩苷组以1．259／kg体重剂量腹腔注射IO％D-GalN制备大鼠急性肝衰竭模型，正常组腹腔注射等量生理盐水。黄芩苷组于造模后12h开始每隔12小时以120mg／kg剂量腹腔注射黄芩苷，肝衰竭组注射等量生理盐水。造模后24h、72h、120h和168h各亚组随机处死6只大鼠。采用全自动生化仪检测血清丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)、白蛋白(Alb)和总胆红素(Tbil)水平；苏木素一伊红(HE)染色观察肝脏病理学变化；反转录酶一聚合酶链锁反应(RT—PCR)检测肝组织核转录因子一KB(NF—KB)、肿瘤坏

3、死因子一Q(TNF—Q)、凋亡蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达：免疫组化和免疫印记(westernblot，WB)法检测NF-KB蛋白动态表达。数据采用SPSS18．0软件进行统计分析，计量资料用均数±标准差(z±S)表示。样本均数比较采用单因素方差分析(One—wayANOVA)。P<0．05表示差异有统计学意义。结果：1．D-Gal1．259／kg腹腔注射成功构建了大鼠急性肝衰竭模型。肝衰竭组168h死亡率为40％(4／10)，黄芩苷组死亡率为20％(2／10)。肝衰竭组大鼠肝脏色泽灰白，表面可见散在的点、片状出血点及瘀斑；

4、光镜下可见肝小叶结构严重破坏，肝组织结构紊乱。与肝衰竭组各时间点相比，黄芩苷组大鼠肝脏肝细胞坏死情况明显减轻。2．肝衰竭组血清ALT、AST、TBil水平较对照组显著升高，72h时达最高水平(659．17±36．76，735．48±31．48，8．38_+0．39)，差异有统计学意义(F=336．572，289．082，102．135；P

5、(1．1784-O．021)，随后逐渐降低，与正常组(O．385±0．056)相比，差异有统计学意义(F=879．830，P<0．001)；TNF-a在造模后表达水平逐步增高，72h达高峰(0．698±0．023)，随后稍有所下降，仍显著高于对照组，各组与对照组相比差异有统计学意义(F=209．63，401．982，172．330，6．113；P<0．001，P<0．001，P<0．001，P=0．039)。Caspase-3mRNA表达量也于72h达到高峰(1．949±0．104)，与正常组相比差异有统计学意义(F=249．674，P<0

6、．001)随后逐渐降低，到达168h时表达量(1．008±0．080)与正常组(1．070±0．068)水平相当，差异没有统计学意义(仁1．731，P=0．225)。黄芩苷组NF-KB、TNF-Q、Caspase一3mRNA表达趋势与肝衰竭组相同，72h达高峰，但表达量较肝衰竭组明显减少，差异有统计学意义(F=603．801，42．174，27．222，P<0．001，P<0．001，P=0．001)。4．免疫组化显示造模后NF-KB蛋白的表达量随着时间延长而渐增，并于72h达高峰(0．192±0．007)，且以细胞核表达为主，细胞质内仍有

7、少量表达，还可见浸润的炎性细胞内也有少量表达；随后表达量有所降低，且胞核表达量明显减少。黄芩苷组NF-KB蛋白的表达也于72h达到最大值，但其表达量较肝衰竭组减少，其差异有统计学意义(F=8．903，P=-0．017)。5．直线相关分析结果显示，TNF_Q、Caspase一3mRNA表达水平与N卜KBmRNA表达水平均呈正相关(r=O．916，0．859；均P<0．001)。结论：1．腹腔注射10％的D-Gal1．259／kg，成功建立大鼠急性肝衰竭模型；其可能机制为诱导TNF-Q的表达增加从而上调NF—KB及caspase一3的表达而导致

8、急性肝衰竭。2．黄芩苷对D一氨基半乳糖诱发的大鼠急性肝衰竭有保护作用，其机制可能与黄芩苷下调NF-KB、TNF-Q并l：lCaspase一3的表达有关。关键词黄芩苷；急性肝衰竭；