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时间:2019-02-19
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1、河北医科大学硕士学位论文妊娠甲亢大鼠甲状腺功能及肝脏凋亡蛋白表达的影响姓名:王芳申请学位级别:硕士专业:内科学指导教师:王瑞英201203中文摘要妊娠甲亢大鼠对仔鼠甲状腺功能及肝脏凋亡蛋白表达的影响摘要目的:甲状腺功能亢进症(hyperthyroidism)简称甲亢,是指甲状腺腺体本身产生甲状腺激素过多而引起的甲状腺毒症,表现为高代谢症候群,对精神神经系统,心血管系统,消化系统,骨骼肌肉和生殖系统均有不同程度的影响。甲状腺功能亢进症在妊娠期的发病率是O.1.0.2%。甲状腺激素(T4)可以透过胎盘进入胎儿血液循环系统。妊娠期甲亢对母体和后代均有影响,可能导致宫内生长受限,早产,死产,新
2、生儿甲亢或甲减等。国内外研究表明,甲状腺功能亢进时,促凋亡蛋白(caspase.3)表达增多而抗凋亡蛋白(Bcl.2)表达下调引起肝脏的细胞凋亡作用增加。本研究主要探讨母体不同程度甲亢对子代不同生长发育期甲状腺功能的影响,以及子代的肝脏凋亡蛋白的表达。方法:将雌性SD大鼠随机分为正常对照组(N组),轻度甲亢组(A组),重度甲亢组(B组)。通过给予不同剂量左甲状腺素钠连续灌胃方法,制作大鼠甲状腺功能亢进模型。模型成功后各组雌性大鼠以2:1比例与雄性SD大鼠合笼,A组B组雌鼠受孕后继续给予左甲状腺素钠灌胃,N组雌鼠给予同等量生理盐水。观察每组母鼠及所生雄性仔鼠一般情况。测定仔鼠21天和60
3、天甲状腺功能,观察其0天,21天,60天肝脏组织HE染色组织病理结构并应用westernblotting技术检测各组仔鼠各时期肝脏组织凋亡蛋白caspase.3和Bcl.2的表达。结果:1.母鼠的一般情况:正常对照组大鼠进食饮水量,日常活动精神状态均正常。轻度甲亢组大鼠进食饮水量较正常组稍增加,日常精神状态较正常对照组稍兴奋。重度甲亢组大鼠进食饮水量较正常对照组明显增加,日常精神状态较正常对照组亢奋,易激惹,呈现出明显的高代谢症候群。2.母鼠甲状腺功能测定:随着甲亢症状的加重,FT3、FT4逐渐增高,TSH逐渐降低。轻度甲亢组与重度甲亢组FT3、FT4均较正常对照组显著升高(尸4、1),且重度甲亢组FT3、FT4较轻度甲亢组显著升高俨5、TSH较轻度甲亢组减低(P6、甲亢子代大鼠肝脏组织病理学改变:正常对照组子代大鼠肝脏组织细胞排列整齐。轻度甲亢组和重度甲亢组子代大鼠的肝脏组织肝小叶无序混乱和局部肝细胞坏死,脂肪侵润,细胞质液泡化,细胞核不规则和肝细胞色素沉着。随着甲亢程度的增加,这种表现也愈加明显。6.甲亢子代大鼠肝脏组织凋亡蛋白的表达:轻度甲亢组和重度甲亢组2l天的caspase.3蛋白的表达较正常对照组上调(P<0.01),轻度甲亢组60天的caspase.3蛋白的表达与正常对照组相比无统计学意义上的差别(P>0.05),重度甲亢组60天的caspase.3蛋白的表达较正常对照组明显上调(P<0.01)。且各组仔鼠21天和60天的caspas7、e.3蛋白的灰度值结果符合球对称分布,分组因素与时间因素具有交互作用(P<0.01),时间因素的作用差别具有统计学意义(P<0.05)。轻度甲亢组和重度甲亢组21天的Bcl.2蛋白的表达较正常对照组下调(P<0.01),轻度甲亢组60天的Bcl.2蛋白的表达与正常对照组相比无统计学意义上的差别(P>0.05),重度甲亢组60天的Bcl.2蛋白的表达较正常对照组明显下调(P<0.01),且各组仔鼠Bcl.2蛋白的灰度值结果符合球对称分布,分组因素
4、1),且重度甲亢组FT3、FT4较轻度甲亢组显著升高俨5、TSH较轻度甲亢组减低(P6、甲亢子代大鼠肝脏组织病理学改变:正常对照组子代大鼠肝脏组织细胞排列整齐。轻度甲亢组和重度甲亢组子代大鼠的肝脏组织肝小叶无序混乱和局部肝细胞坏死,脂肪侵润,细胞质液泡化,细胞核不规则和肝细胞色素沉着。随着甲亢程度的增加,这种表现也愈加明显。6.甲亢子代大鼠肝脏组织凋亡蛋白的表达:轻度甲亢组和重度甲亢组2l天的caspase.3蛋白的表达较正常对照组上调(P<0.01),轻度甲亢组60天的caspase.3蛋白的表达与正常对照组相比无统计学意义上的差别(P>0.05),重度甲亢组60天的caspase.3蛋白的表达较正常对照组明显上调(P<0.01)。且各组仔鼠21天和60天的caspas7、e.3蛋白的灰度值结果符合球对称分布,分组因素与时间因素具有交互作用(P<0.01),时间因素的作用差别具有统计学意义(P<0.05)。轻度甲亢组和重度甲亢组21天的Bcl.2蛋白的表达较正常对照组下调(P<0.01),轻度甲亢组60天的Bcl.2蛋白的表达与正常对照组相比无统计学意义上的差别(P>0.05),重度甲亢组60天的Bcl.2蛋白的表达较正常对照组明显下调(P<0.01),且各组仔鼠Bcl.2蛋白的灰度值结果符合球对称分布,分组因素
5、TSH较轻度甲亢组减低(P6、甲亢子代大鼠肝脏组织病理学改变:正常对照组子代大鼠肝脏组织细胞排列整齐。轻度甲亢组和重度甲亢组子代大鼠的肝脏组织肝小叶无序混乱和局部肝细胞坏死,脂肪侵润,细胞质液泡化,细胞核不规则和肝细胞色素沉着。随着甲亢程度的增加,这种表现也愈加明显。6.甲亢子代大鼠肝脏组织凋亡蛋白的表达:轻度甲亢组和重度甲亢组2l天的caspase.3蛋白的表达较正常对照组上调(P<0.01),轻度甲亢组60天的caspase.3蛋白的表达与正常对照组相比无统计学意义上的差别(P>0.05),重度甲亢组60天的caspase.3蛋白的表达较正常对照组明显上调(P<0.01)。且各组仔鼠21天和60天的caspas7、e.3蛋白的灰度值结果符合球对称分布,分组因素与时间因素具有交互作用(P<0.01),时间因素的作用差别具有统计学意义(P<0.05)。轻度甲亢组和重度甲亢组21天的Bcl.2蛋白的表达较正常对照组下调(P<0.01),轻度甲亢组60天的Bcl.2蛋白的表达与正常对照组相比无统计学意义上的差别(P>0.05),重度甲亢组60天的Bcl.2蛋白的表达较正常对照组明显下调(P<0.01),且各组仔鼠Bcl.2蛋白的灰度值结果符合球对称分布,分组因素
6、甲亢子代大鼠肝脏组织病理学改变:正常对照组子代大鼠肝脏组织细胞排列整齐。轻度甲亢组和重度甲亢组子代大鼠的肝脏组织肝小叶无序混乱和局部肝细胞坏死,脂肪侵润,细胞质液泡化,细胞核不规则和肝细胞色素沉着。随着甲亢程度的增加,这种表现也愈加明显。6.甲亢子代大鼠肝脏组织凋亡蛋白的表达:轻度甲亢组和重度甲亢组2l天的caspase.3蛋白的表达较正常对照组上调(P<0.01),轻度甲亢组60天的caspase.3蛋白的表达与正常对照组相比无统计学意义上的差别(P>0.05),重度甲亢组60天的caspase.3蛋白的表达较正常对照组明显上调(P<0.01)。且各组仔鼠21天和60天的caspas
7、e.3蛋白的灰度值结果符合球对称分布,分组因素与时间因素具有交互作用(P<0.01),时间因素的作用差别具有统计学意义(P<0.05)。轻度甲亢组和重度甲亢组21天的Bcl.2蛋白的表达较正常对照组下调(P<0.01),轻度甲亢组60天的Bcl.2蛋白的表达与正常对照组相比无统计学意义上的差别(P>0.05),重度甲亢组60天的Bcl.2蛋白的表达较正常对照组明显下调(P<0.01),且各组仔鼠Bcl.2蛋白的灰度值结果符合球对称分布,分组因素
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