小麦孢囊线虫滞育机理与大豆孢囊线虫蛋白质组分析

《小麦孢囊线虫滞育机理与大豆孢囊线虫蛋白质组分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、4．4．1．2H．avenae滞育孢囊及非滞育孢囊差异蛋白质的分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一764．4．2大豆孢囊线虫蛋白质组的分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．774．4．2．1H．glycines白色雌虫与褐色孢囊表达相同蛋白质的分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯774．4．2．2H．glycines白色雌虫与褐色孢囊差异表达蛋白质的分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯785结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8l5．1不同温度处理对小麦孢囊线虫孵化的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯815．2不同无机离子对小麦孢

2、囊线虫孵化的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯815．3小麦孢囊线虫解除滞育的过程中代谢产物的变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8l5．4小麦孢囊线虫及大豆孢囊线虫蛋白质组的分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一83致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一94山东农业大学硕士学位论文中文摘要小麦孢囊线虫(cerealcystnematode，CCN，Hetoroderatlveglae)病在世界范围造成严重的危害，是制约小麦及大麦生产的主要因素之一。为明确山东泰安小麦孢

3、囊线虫的孵化特点，于2012年对自然及室内条件下的小麦孢囊线虫在室内离体条件下，开展了温度及无机离子对其孵化影响的试验；为了明确小麦孢囊线虫在解除滞育过程中生理变化，本研究对3种不同滞育程度孢囊的几种代谢物质进行了比较；为了深入研究小麦孢囊线虫的滞育机制及大豆孢囊线虫(soybe孤cystnematode，SCN，Heteroderaglycines)色雌虫与褐色孢囊的蛋白质差异，本研究分别对两种孢囊的蛋白质组进行了分析。研究结果如下：1．不同温度对小麦孢囊线虫孵化的影响通过试验，发现小麦孢囊线虫孢囊卵和自由卵对温度处理的响应一致。未经低温处理的孢囊卵和自由卵无线虫孵出

4、，4"C低温处理能使小麦孢囊线虫解除滞育，15"(2温育是孢囊卵和自由卵孵化的最适温度，4—15℃线虫孵出量明显高于15℃、15-4"C、4．25℃、15．25"C、25℃恒温、25_4℃、25—15℃等温度处理。将孢囊置于4"C低温处理150d后，其最高累积孵化率达到72％，明显高于4"C低温处理30d后转至15"C温育的孵化率(56．2％)。小麦孢囊线虫白色雌虫在4"C、15"C、20℃、25"(2四个温度处理下均没有线虫孵出，温度越低其变褐的速度越慢。白色雌虫内的卵处于不同的发育时期，其中O(幼虫形成)时期形态的卵占12．7％，绝大多数的卵都处于发育初期阶段。随着

5、时间的延长，初期形态的卵逐渐发育，N(原肠形成)、O两发育时期的卵逐渐增多，尤其O时期的卵，在30d时达到72．7％。2．不同的无机离子对小麦孢囊线虫孵化的影响本试验供试5种无机化合物CaCl2、MgCl2、FeCl3、ZnCl2、CuCl2，分别作用于自然状态下滞育的小麦孢囊线虫、非滞育的小麦孢囊线虫及经低温处理后仍滞育的小麦孢囊线虫，发现ZIl2+溶液对小麦孢囊线虫有明显的刺激作用，且对非滞育CCN的刺激作用更加明显，Fe3+溶液也表现一定的刺激作用，但其作用明显小于Zn2+溶液，且在试验过程中，Zn2+溶液中孵化出的线虫是活动的，而Fe3+溶液中的线虫是僵直不动的

6、。其机制还有待进一步研究。l小麦孢囊线虫滞育机理及大豆孢囊线虫蛋白质组分析3．小麦孢囊线虫在解除滞育过程中代谢产物的变化小麦孢囊线虫具有高温滞育，低温解除滞育的特性。滞育的小麦孢囊线虫经4℃0周、5周和lO周，在诱导解除滞育的过程中总糖的含量没有显著性变化；糖原的含量是逐渐下降；低温处理10周的孢囊海藻糖的含量明显降低；甘油含量明显降低；海藻糖酶及酯酶的活性明显增高；酯酶同工酶电泳中，4。C一10周的孢囊的电泳条带最多，共有4个条带，其迁移率Rf值依次为0．21、O．24、0．30、0．34。小麦孢囊线虫的非滞育率越高，其蛋白质含量也就越高。在蛋白质SDS．PAGE电泳

7、图谱中滞育的孢囊和4"C一5周的孢囊有分子量15．5KDa的谱带而4"C一10周的孢囊没有，同时分析结果表明该蛋白在滞育孢囊的蛋白中所占比例最大；4"c一5周孢囊的21．8KDa蛋白谱带比较浅，蛋白量较少。4．小麦孢囊线虫及大豆孢囊线蛋白质组的分析利用双向电泳技术分离两种孢囊的全蛋白，得到差异蛋白点，质谱分析鉴定差异蛋白。Havenea滞育和非滞育卵中分别有409、412个蛋白表达，二者共同表达蛋白质401个，差异蛋白19个，质谱鉴定出10个差异蛋白质；大豆孢囊线虫白色雌虫及褐色孢囊分别表达了176、78个蛋白点，差异蛋白点有165个：质