滞育对草地螟核酸蛋白含量组分及飞行能力的影响

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1、华中农业大学硕士学位论文滞育对草地螟核酸蛋白含量组分及飞行能力的影响姓名：张健华申请学位级别：硕士专业：农业昆虫与害虫防治指导教师：罗礼智201206滞肯对草地螟生理调控及十态习性的影响摘要草地螟LoxostegesticticalisL．(鳞翅目：螟蛾科)是一种兼具远距离迁飞和滞育习性的害虫，由于对草地螟滞育越冬规律、滞育特性缺乏系统深层次的研究，从而影响了预测预报与防治措施的效果。为了更好地了解草地螟的为害规律，并为预测预报和综合防治技术提供更系统更全面的科学依据，本文在认真总结草地螟国内外相关研究领域进展的基础上，对草地螟滞育幼虫的蛋白和核酸含量变化，滞育幼虫与非滞育幼虫间的

2、蛋白组差异，滞育对草地螟卵巢发育与飞行行为的影响等进行了比较系统的研究，并获得了一些新的结果，主要结果为：研究结果首次揭示了草地螟滞育与非滞育幼虫之间的核酸和蛋白含量的差异。用Trizol法、DNA和蛋白质定量试剂盒、SDS—PAGE电泳技术分别对滞育1，2，3和4个月、解除滞育以及非滞育老熟幼虫中的核酸含量、总蛋白含量和组分的变化进行了测定。结果表明，滞育时长不同的幼虫总RNA含量显著低于非滞育幼虫，解除滞育幼虫的总RNA含量显著高于滞育2、3和4个月的幼虫，但显著低于非滞育的对照幼虫；滞育不同时长、非滞育以及解除滞育幼虫的总DNA含量之间没有显著差异：RNA／DNA比值随滞育的

3、开始而显著下降，随着滞育的结束而显著上升：滞育不同时长的幼虫总蛋白含量显著高于非滞育幼虫的总蛋白含量，但解除滞育与非滞育幼虫的总蛋白含量之间无显著差异；利用SDS．PAGE电泳分析发现滞育幼虫体内存在滞育关联蛋白，蛋白条带在24kDa左右，但非滞育和已经解除滞育的幼虫则没有该蛋白条带。这些结果表明，总RNA含量的降低、RNA／DNA比值下降、总蛋白含量的升高，以及24kDa蛋白的存在是草地螟幼虫滞育的主要生理特征。研究结果首次明确了草地螟滞育与非滞育幼虫之间的蛋白种类及其表达的差异。利用双向电泳技术和质谱技术分析了草地螟滞育与非滞育幼虫之间的蛋白表达差异，发现14个阳性蛋白位点存在

4、明显差异，经质谱鉴定这14个蛋白位点为具有不同功能特性的蛋白质。分别属于ATP酶，骨架蛋白，信息途径调控蛋白和代谢类酶。其中有ATPsynthasebetasubunit，Myosinheavychain，Tubulinbeta-1chain，14—3—3zeta，14—3—3zeta和14—3．3epsilonprotein仪存在非滞育幼虫中，Myosinheavychain(muscle)仅存在滞育幼虫rfl。滞育和非滞育幼虫蛋白表达差异的明确对于我们了解草地螟滞育特点，探寻草地螟滞育相关的关键基因和蛋白，揭示在滞育发生过程内在的蛋白质组学以及分子调控机理具有重要的意义。研究结

5、果明确了滞育对草地螟卵巢发育和飞行能力的影响。系统研究了滞育处理后草地螟的卵巢发育级别、产卵前期、产卵历期、总产卵量、飞行肌干重、能源物质含量和飞行能力参数。结果表明，滞育对草地螟成虫卵巢发育级别、产华-I一农、Ik大学2012届硕士研究牛学位论文卵前期、产卵历期、巾胸背纵肌干重、能源物质含量、飞行能力均有．显著影响。经过滞育后的雌成虫卵巢发育减缓，产卵前期和产卵历期延长，但对总产卵量无差异影响。而分别滞育二个半月与五个月后羽化的雌蛾之间的卵巢发育级别和生殖参数之间不存在显著差异。同时，滞育对草地螟飞行潜力具有显著促进作用。草地螟经过滞育后飞行能力显著增强，飞行肌和能源物质含量均显

6、著增加。而随着滞育时间的延长，滞育对飞行的促进效果则逐渐减弱，表现为滞育二个半月羽化成虫的飞行能力、飞行肌干重和能源物质含量均高于滞育五个月羽化的成虫。结果表明，滞育对草地螟的生殖具有明显抑制作用，但对草地螟的飞行具有显著促进效果。滞育后的草地螟仍可以通过迁飞来选择最佳的生境。关键词：草地螟；滞育：蛋白；核酸；生殖：迁飞AbstractThebeetwebworm，LoxostegesticticalisL．(Lepidoptera：Pyralidae)，whichnotonlyhaslongdistancemigrationcharacteristic，alsohasthewin

7、terdiapausecharacteristie．Becausethecharacteristicsofthediapasusesourceandtheregularityofdiapauseoverwinteringwerenotstudiedsystematically，thereisahardroadonforecastingandcontrollingthispest．Inordertoimprovetheforecastingandcontrollingt