竹节参总皂苷对急性心肌梗死大鼠的保护作用及机制研究

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1、分类号R96密级公开UDC硕士学位论文竹节参总皂苷对急性心肌梗死大鼠的保护作用及机制研究学位申请人：徐媛青学科专业：药理学指导教师：袁丁教授二○一二年五月ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineCardioprotectiveeffectsandmechanicalstudyoftotalsaponinfromPanaxjaponicusC.A.Meyonacutemyo

2、cardialinfarctionInRatsGraduateStudent:XuYuanqingMajor:PharmacologySupervisor:Prof.YuanDingChinaThreeGorgesUniversityYichang,443002,P.R.ChinaMay,20122三峡大学硕士学位论文三峡大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果

3、。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明，本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。学位论文作者签名：日期：三峡大学研究生知识产权承诺书本人承认：我作为三峡大学硕士研究生在校学习期间，在导师指导下，依据研究工作所作学位论文的知识产权全部权归三峡大学所有。本人承诺：我有义务维护三峡大学的知识产权，凡是以我本人学位论文内的全部或部分研究成果，或实验数据为基础所形成的研究论文及成果，无论是以何种形式刊发学术论文、进行成果鉴定或申报奖励，均以三峡大学为第一作者单位或完成单位，并事先征得导师或学

4、校相关部门的同意。我愿承担因违背上述承诺而引起的一切法津和经济后果。学位论文作者签名：日期：I三峡大学硕士学位论文内容摘要目的：通过结扎大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌梗死模型，研究竹节参总皂苷对大鼠急性心肌梗死的保护作用，并初步探寻其可能的作用机制；通过H2O2诱导H9c2心肌细胞株氧化应激损伤模型，研究竹节参总皂苷对H9c2心肌细胞株的保护作用，进一步明确其对急性心肌梗死的保护作用机制。方法：（1）实验一：采用结扎大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌梗死模型，将手术后成活的大鼠随机分为模型组、竹节参

5、总皂苷低、高剂量组，另取假手术的大鼠作为假手术组，竹节参总皂苷低、高剂量组大鼠分别灌胃给予50mg/kg、100mg/kg的竹节参总皂苷，假手术组和模型组给予相应体积的生理盐水，每天1次，连续给药1周后进行实验。记录完血压和心功能检测后，打开大鼠腹腔，腹后腔主动脉取血，分离血清，进行乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性及丙二醛（MDA）含量检测；取血完毕后，快速取出大鼠心脏，用生理盐水洗去残留血液，用洁净纱布吸干水分后，进行全心拍照和称

6、重；然后切取心肌组织经HE、Masson和电镜染色后分别进行心肌梗塞面积和心肌组织显微和超微形态分析，另取一部分心脏组织用Real-timePCR技术进行HO-1、Txn-1、Txnrd-1、GCLc及Nrf2mRNA的表达分析。（2）实验二：培养H9c2心肌细胞株，用H2O2诱导其氧化应激损伤，实验组随机分为正常组、模型组（H2O2）、竹节参总皂苷低剂量组（H2O2＋50μg/mL）和竹节参总皂苷高剂量组（H2O2＋100μg/mL），竹节参总皂苷低、高剂量组孵育24小时，MTT法检测H9c2心肌细胞存活

7、率，比色法测定其培养液中LDH和MDA含量，同时检测培养液中SOD、CAT及GSH-Px的活性；Hoechst33342染色观察H9c2心肌细胞株凋亡形态，荧光显微镜观察细胞内ROS的荧光强度；流式细胞仪检测竹节参总皂苷对氧化应激诱导的细胞凋亡；Real-timePCR测定Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达，并计算Bcl-2与Bax的比值。结果：（1）实验一：竹节参总皂苷能够明显改善急性心肌梗死大鼠的心功能，表现为降低左心室舒张末期压（LVEDP），增大收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、平均动脉

8、压（MAP）、左室压上升最大速率（LV+dp/dtmax）、左室压下降最大速率（LV-dp/dtmax）和左心室收缩压（LVSP）（P<0.05，P<0.01）；竹节参总皂苷低、高剂量组能明显降低心脏重量指数和梗死面积（P<0.05，P<0.01）；竹节参总皂苷低、高剂量组能明显降低血清中LDH的含量及MDA的含量，升高血清中SOD、CAT和GSH-Px酶的活性（P<0.05，P<0.01）；HE染色观察发现：竹