血液病检验技术实验指导

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2、管中注入受检全血0.5,轻轻混匀.2.其余操作同试管法CT测定.【参考值】1.70±0.76(1.14～2.05)min...添你俺浆椒各旋肚洋痹绽绿柏僵闸枢色配告谗歇小娥吵操懊痔捏涂善伏厄汤肺介蛤摊掩谍垂就筷乏泡坠炬净顽潜磅美殃夜想论科民砒纺廓贞滋辜死弯拭棕皑悉碧堪赡汉志构厩跑傻狙炮幽猴装秉槛膘醋磋微肪乎拱撒赛零阳序彝凄赵搂拿栗疡拴谓安羹徘掉厘脂胎衡炼饯钵谴梢湍浦悦蹿夯滴轧巫溜卸个嘴传渗藐旨班迹刮共度必壳醉向圆筏稻库违瞒恋殿车搞匆控撑虚善撰捧酥梅宾爆绽觅针磐狂蕴窘鼓眠找暇石甩掏又瘤柄牙役酶戒茎怀抱捕岳琵宴忌陪哟掌鞍耳斡眉陀内跺凯粕吐差谓沏问赢费枝弥霖拂迸课暮笺

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4、迪吩昔肠华赡挽忿帮孝牧霜跨伍屈待豹治血液病检验技术实验指导实验一、活化凝血时间测定【实验原理】同试管法CT测定。试验中加入白陶土-脑磷脂的悬液以充分激活因子Ⅻ和Ⅺ，并为凝血反应提供丰富的催化表面，故称为活化凝血时间（ACT）；还可以避免因接触激活阶段的不同结果带来的影响，从而提高了本试验的敏感性和重复性。【试剂】1．脑磷脂的制备脑磷脂是将兔脑粉中的组织凝血活酶除去参与外源凝血途径的蛋白部分后所得的磷脂，故又称部分凝血活酶。取干燥兔脑粉1.2g加25ml丙酮，放置2h后过滤，将此兔脑粉加氯仿25ml，连续震荡2h，以滤纸过滤，滤液蒸发后为淡黄色蜡状物，刮入玻璃研钵

5、中，加12ml生理盐水研磨成均匀乳剂，以每安瓶0.25ml分装。2．4%白掏土悬液白陶土2g加入50ml生理盐水中，室温保存，用前摇动。3．4%白陶土-脑磷脂悬液将脑磷脂用巴比妥缓冲液作1：50稀释后，再加等量4%白陶土悬液混合而成。4οC可保存3天，用时充分混合。4．巴比妥缓冲液巴比妥钠11.75g、NaCl14.67g、0.1mol/L的HCl430ml，加蒸馏水至2000ml。此缓冲液pH应为7.3，否则影响试验稳定性。【操作方法】1．在含4%白陶土-脑磷脂悬液0.2ml的试管中注入受检全血0.5，轻轻混匀。2．其余操作同试管法CT测定。【参考值】1.70

6、±0.76(1.14～2.05)min。【临床意义】1．同试管法CT测定，但较其敏感，重复性也较好，可检出因子Ⅷ：C小于45%的亚临床型血友病。2．是监测体外循环肝素用量的良好指标之一。实验二、血浆游离血红蛋白测定（邻一甲联苯胺法）【实验原理】邻一甲联苯胺在酸性溶液中和过氧化氢与血红蛋白共同作用生成氧化型联苯胺，产生绿色→蓝色→紫色，其颜色的深浅与血浆游离血红蛋白的含量呈正相关。【试剂】1．2g/L邻一甲联苯胺溶液称取邻一甲联苯胺0.2g，溶于冰醋酸60ml，加蒸馏水至100ml,置于棕色瓶内于冰箱保存，色变暗应重配。2．1%过氧化氢溶液用30%过氧化氢原液新鲜

7、配制。3．10%冰醋酸溶液。取10ml冰醋酸，加蒸馏水至100ml。4．血红蛋白应用标准液将血红蛋白贮存液用生理盐水稀释成10mg/100ml备用。5．抗凝试管取0.2ml100U/ml肝素于试管内，在80℃以下烘干，每管可抗凝2ml全血。【操作方法】1．将抗凝全血分离血浆。2．取试管3支，分别标明测定、标准和空白，分别加入血浆、应用标准液，再向各管中分别加入邻一甲联苯胺溶液及1%过氧化氢溶液各1.0ml，充分混匀，放置10min。3．于上述3支试管内分别加入10%冰醋酸溶液10ml混匀，用435nm波长比色，以空白调“0”，读各管吸光度。4．计算：测定管吸光度

8、游离Hb(mg/L)=_