芳香烃受体在胎盘组织的表达及其对胎盘滋养层细胞增殖的影响

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1、万方数据指导小组成员名单段涛教授王凯副研究员万方数据目录缩略语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2ABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6刖雷⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8一、仪器和试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8二、材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11三、结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27四、讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40五、结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44后记⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47附录1：研究生期间已发表及待发表的文章⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48附录2：综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．49论文独创声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一封底万方数据复旦大学硕士学位论文缩略语

3、AhRarylhydrocarbonreceptor芳香烃受体CYP1A1cytocllromeP450，family1，subfamilyA，polypeptide1细胞色素P4501A1CYP1B1cytochromeP450，family1，subfamilyB，polypeptide1ARNTXREITEGAPDHDMEMMEMmPEsPEFBSPIPCRIU、-PCRPBSDMSOP／S细胞色素P450181arylhydrocarbonreceptorucleartranslocator芳香烃受体核转运蛋白xenobiotic---responsiveelement芳香

4、烃受体反应原件2一f1’H-indole一3’-carbonyl)一thiazole-4-carboxylicacidmethylester2—<1IH．吲哚．3’．羰基)噻唑．4．羧酸甲酯glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase3-磷酸甘油醛脱氢酶Dulbecco’SModifiedEagleMediumDMEM培养基MinimumEssentialMediumEagleMEM培养基mildPreeclampsia轻度子痫前期severePreeclampsia重度子痫前期FetalBorineSerum胎牛血清PropidiumIodide

5、碘化吡啶polymerasechainreaction多聚酶链反应ReverseTranscriptionPCR反转录聚合酶链反应PhosphateBufferedSaline磷酸盐缓冲液Dimethylsulfoxide二甲基亚砜penicillin／streptomycinsolution青链霉素双抗万方数据复旦大学硕士学位论文中文摘要研究目的芳香烃受体(AhR)是一种配体激活的转录因子，大量的研究证实芳香烃受体通过调控下游靶基因的转录，参与调节多种生物学过程，包括细胞周期调控、免疫稳态维持、氧化应激反应、胎盘血管的发育和重塑、生殖等。芳香烃受体在人体多种组织广泛表达，在胎盘的

6、表达水平尤高，且主要分布于胎盘合体滋养层细胞和胎盘血管内皮细胞，而胎盘组织的重要的生物转化酶CYPlAl、CYPlBl皆为其下游靶基因。本实验收集了孕早期流产的胎盘组织，孕晚期的正常胎盘组织和轻度子痫前期胎盘组织，通过免疫组织化学，westernbloting，RT—PCR和Real—timePCR技术检测芳香烃受体及其下游的靶基因CYPIAI和CYPlBl在胎盘组织的分布及其表达水平，进一步利用芳香烃受体的内源性配体ITE及人滋养层细胞系JEG一3和JAR细胞研究芳香烃受体对滋养层细胞的增殖、迁移的影响。材料与方法1、取正常(不合并其它疾病，未发现胎儿染色体异常)妊娠6—8周，行

7、人工流产术的病人胚胎的绒毛组织，正常足月妊娠和轻度子痫前期病人足月妊娠(孕37周一40周)，行择期剖宫产的胎盘组织(除去蜕膜和胎膜)，即我们的研究对象。2、通过免疫组织化学染色的方法，了解芳香烃受体在孕早期胎盘组织，正常孕晚期胎盘组织和子痫前期胎盘组织中的分布情况。3、通过Westernblotting方法测定芳香烃受体蛋白在三种组织的表达情况。4、通过RT—PCR和Real—timePCR测定芳香烃受体mRNA，及其下游靶基因CYPlAl和CYPlBlmRNA在早期