雷公藤多甙对克罗恩病大鼠模型的治疗作用及机制研究

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1、东南大学硕士学位论文雷公藤多甙对克罗恩病大鼠模型的治疗作用及机制研究姓名：郑宇申请学位级别：硕士专业：临床医学指导教师：嵇振岭2012-05-28中文摘受雷公藤多甙对克罗恩病大鼠模型的治疗作用及机制研究东南大学医学院研究生：郑宇导师：嵇振岭教授摘要目的：研究雷公藤多甙对2，4，6一三硝基苯磺酸(TNBS)／乙醇诱导的实验性克罗思病大鼠模型的治疗作用，并从TGF一13I／Smad信号通路的角度进一步探讨其可能的作用机制。方法：将雌性未]芎Sprague．Dawley(sD)大鼠36只随机分为4组，每组9只。除空白组外其余3组均以TNBS／乙醇混合液lml(内含TNBS

2、30mg与99％乙醇0．4m1)灌肠，制各实验性克罗恩病模型。造模后模型组予生理盐水2ml灌胃12天，雷公藤多甙治疗组予雷公藤多甙溶液60mg／(kg·d)，连续灌胃12天，强的松治疗组予强的松溶液5mg／(kg·d)，连续灌胃12天。通过观察大鼠一般情况、体重、结肠大体病理和组织病理来评价雷公藤多甙对实验性克罗恩病大鼠模型的治疗效果。逆转录一聚合酶链反应(RT．PCR)方法测定结肠组织中TGF．Bl、Smad3、Smad4、Smad7mRNA的表达情况，通过免疫印迹(WesternBlot)方法测定TGF．131、磷酸化Smad2／3(p—Smad2／3)蛋白表达

3、情况，并进一步分析雷公藤多甙对克罗恩病大鼠模型TGF．131／Smad信号通路的影响。结果：雷公藤多甙治疗组及强的松治疗组大鼠的症状均明显轻于模型组(P<0．05)；雷公藤多甙治疗组及强的松治疗组大鼠的结肠大体病理和组织病理均轻于模型组(P<0．05)。结肠组织TGF．131、Smad3mRNA表达水平雷公藤多甙治疗组低于模型组及强的松治疗组(P<0．05)；Smad7mRNA表达水平雷公藤多甙治疗组高于模型组及强的松治疗组(P<0．05)；TGF．131、磷酸化Smad2／3(p．Smad2／3)蛋白表达水平雷公藤多甙治疗组低于模型组及强的松治疗组(尸<0．05)

4、。结论：雷公藤多甙在体内具有改善克罗恩病的作用；雷公藤多甙通过调节TGF-131／Smad信号通路中关键信号分子Smad3、p-Smad2／3核酸或蛋白的表达，l东南人学硕l：学位论文干预TGF．pl／Smad信号通路的信号转导，改善克罗恩病。关键词：克罗恩病，雷公藤多甙，2，4，6---硝基苯磺酸，转化生长因子[31，Smad蛋白英文摘要TheprotectiveectsandmechanismsoftripterygiumwllIOrdnpolyglycosldmmin"It·●●^⋯●'‘o～。’‘。’1。’Crohn7SdiseasemodelOtratsM

5、edicalCollege，SoutheastUniversityPostgraduate：ZHENGYuSupervisor：Prof．儿Zhen·lingAbstractObjective：TostudytheprotectiveeffectsoftripterygiumwilfordiipolyglycosidiuminTNBS／ethanolinducedexperimentalCrohn’Sdisease，andtoexplorethemechanismsfromtheperspectiveofTGF一1／Smadsignalingpathway．Meth

6、ods：36VirginfemaleSprague—Dawleyratswererandomlydividedintofourgroupsintheexperiment．ExperimentalCrohn’sdiseasewasinducedbyasingleintracolonicenemaofTNBS／ethanolsolution(TNBS30mg，99％ethanol0．4m1)intothelumenofdescendingcolon．BlankgroupwerenotinducedexperimentalCrohn’Sdisease．NS(2m1)，GT

7、W(60mg／kg)，prednisone(5mg／kg)，weregivenrespectivelytomodelgroup，GTWgroup，prednisonegroupevery．dayfor12days．Generalcondition，weight，macroscopicandmicroscopicpathologicestimationswereusedtOevaluatetheprotectiveeffects．ExpressionofTGF一131、Smad3、Smad4、Smad7mRNAWasdetectedbyreversetranscr