几种药用植物内生及根际放线菌的分离、鉴定及抗菌活性研究

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1、万方数据SichuanAgriculturalUniversityADissertationSubmittedtoPartialFulfillmentofRequirementforMasterDegree(SoilScience)Isolation，IdentificationandAntibacterialactivityofEndophyticActinobacteriaandRhizosphereSoil‘1。1。‘。SeveralMedicinalPlantsACtlnoDacterlaInevicinlantsZhangBoDirectedby：ZhangXiaopingYu

2、anDagangMay,2014万方数据论文独创性声明1IIIllIIIIILIIIIIIIillIIIIIIlJ012135本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：／1穆伽矽(／年6月幺日关于论文使用授权的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关

3、部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。咏论文不保密。口本论文保密，在一年解密后适用本授权。(请在以上口内划“√”)研究生签名：导师签名：另象一肛狲可√办7I[年更℃f喉Lf，汐月够日．产月分万方数据摘要四川省甘孜地区生态环境特殊，生长于该地区的药用植物种类繁多。本研究从甘孜不同生态区采集24个药用植物样品，通过可培养和免培养方法对植物内生放线菌及根际放线菌多样性进行研究。同时采用对峙实验分析了放线菌对病原菌的抗菌活性。研究结果表明，多种因

4、素会影响放线菌生长、分布及实验室分离。土壤有机质含量和采样地海拔与放线菌分离数量呈负相关；土壤水分与放线菌分离数量呈正相关；而土壤pH与内生放线菌和根际放线菌分离数量分别呈负相关与正相关。相关统计显示，不同培养基分离所得放线菌数量存在明显差异：柠檬酸盐培养基分离所得放线菌最多，其次为五号培养基和高氏一号培养基。植物内生放线菌在不同器官或组织分布也存在差异：根部分离内生放线菌最多，其次为茎部，叶部最少。基于7种放线菌表形特征，通过加权计算对其多样性进行初探，225株放线菌C值、G值存在一定差异，以(G值，C值)为坐标体系，所有放线菌散点分布较为集中。对植物内生放线菌及根际放线菌RLFP研究

5、分析表明，94株根际土壤放线菌与131株植物内生放线菌酶切图谱具有一定差异，分离所得放线菌多样性较为丰富，但存在不均匀的簇群分布。对部分放线菌测序并构建系统发育树分析表明，测序菌株包括2个属，7个种，其中约85％为链霉菌属。对花苜蓿根茎叶花总DNA变性梯度凝胶电泳分析发现，花苜蓿各器官内生放线菌的群落结构及多样性存在差异，花部多样性指数与丰度均最高。放线菌对病原菌拮抗筛选结果显示，不同放线菌对不同病原菌抑制效果存在明显差异。总体而言，放线菌对西瓜枯萎病原菌(Fusariumoxysporumfsp．)抑制效果最好；菌株SCAUSN．2对6种病原菌的抑制明显强于其他放线菌，并对西瓜枯萎病原

6、菌有最大抑制效果。放线菌SCAUSN．2对西瓜枯萎病原菌抑制作用的盆栽实验表明，不同处理后的西瓜苗长势情况差异明显。对不同处理下西瓜苗相关指标统计分析可见，仅喷洒一定浓度西瓜枯萎病原菌菌液处理所有指标偏低，且与其他各处理水平指标存在显著差异。而喷洒放线菌SCAUSN一2菌液处理各指标值偏高，其干预系数IC>_0．5，在很大程度上促进了西瓜幼苗的生长。关键字：药用植物内生放线菌根际放线菌多样性系统发育万方数据AbstractWitllaspecialecologicalenvironmentinGanzi，Sichuanprovince，awidevarietyofmedicinalpla

7、ntsgrowthere．Thisarticlestudiedthediversityofendophyticandrhizosphericactinomycetesisolatedfrom24medicinalplantscollectedfromdifferentenvironmentsinGanzi，usingculture—independentandculture-dependentmethods，andtheantibi