贵州地区需氧放线菌的分离鉴定及抗菌活性的研究

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1、中图分类号：R379.1.单位代码：10660UDC：579.6学号：10660S120025学科专业代码t1001W级（公开贵阳医学院2015届硕士学位论文(科学学位）贵州地区需氧放线菌的分离鉴定及抗菌活性的研究Isolation,identificationandanti-microbialactivitystudyofaerobicactinobacteriainGuizhouprovince研究生：金方导师：王和教授康颖倩教授年级：2012级专业：病原生物学贵阳医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论

2、文是本人在导师的指导下，独立进行研宄工作所取得的成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的成果作品。对本文的研宄做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。除与外单位合作项目将予以明确方式规定外，本研究己发表与未发表成果的知识产权均归属贵阳医学院。本人完全意识到本声明的法律后果由人承担。作者签名（手写）：年：T月%日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅

3、和借阅。本人授权贵阳医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于（请在以下相应方框内打“v”）1、保密□，每_年解密后适用本授权书:2、不保密1作者签名（手写）导师签名（手写）：.•>‘7年$月为以年t月&4中图分类号：R379.1单位代码：10660UDC：579.6学号：10660S120025学科专业代码：100103密级：公开贵阳医学院2015届硕士学位论文（科学学位）贵州地区需氧放线菌的分离鉴定及抗菌活性的研究Isola

4、tion,identificationandanti-microbialactivitystudyofaerobicactinobacteriainGuizhouprovince研究生：金方导师：王和教授康颖倩教授年级：2012级专业：病原生物学（微生物学方向）二〇一五年3月中图分类号：R379.1单位代码：10660UDC：579.6学号：10660S120025学科专业代码：100103密级：公开贵阳医学院2015届硕士学位论文（科学学位）贵州地区需氧放线菌的分离鉴定及抗菌活性的研究Isolation,ident

5、ificationandanti-microbialactivitystudyofaerobicactinobacteriainGuizhouprovince论文作者：金方指导教师：康颖倩教授申请学位：医学硕士培养单位：基础医学院学科专业：病原生物学（微生物学方向）研究方向：系统微生物学研究起止日期：2012年9月至2015年3月论文评阅人：盲评答辩委员会主席：黄山（教授，主任技师）论文答辩日期：2015年05月22日二〇一五年05月贵州地区需氧放线菌的分离鉴定及抗菌活性的研究专业：病原生物学硕士研究生：金方导师：王

6、和教授康颖倩教授【摘要】目的：1、了解贵州土壤需氧放线菌的分布特点、系统发育和物种多样性。2、研究部分放线菌菌株发酵液对临床常见病原性细菌及真菌的抗菌活T性及稳定性。3、确定临床病原菌株IFM10348的分类地位。方法：1、采集贵州贵阳、遵义、安顺、铜仁、毕节、黔南、六盘水、黔东南、黔西南9个区域的农耕地、湿地、森林3个类型土壤标本进行需氧放线菌的分离纯化。酶法提取放线菌基因组DNA,PCR扩增其16SrRNA基因序列后在GenBank中进行Blast比对分析后采用邻接法构建土壤需氧放线菌的系统发育树。2、利用纸片扩

7、散法测定放线菌株发酵液对临床病原菌的抗菌活性及温度、光照、ph的改变对发酵液抗菌活T性稳定性的影响。3、利用多相分类的方法鉴定菌株IFM10348。结果：1、在贵州地区9个区域内共采集到108份土壤标本，从中分离出173株需氧放线菌，黔西南11株、贵阳14株、安顺15株、黔南15株、铜仁18株、毕节23株、遵义24株、六盘水26株、黔东南27株。不同土壤类型分离的菌株数量差别较大，其中农耕地中有90株，湿地、森林土壤中分别有46株和37株。另外，173株菌中包括了链霉菌属（Streptomyces）165株、北里孢菌

8、属（Kitasatospora）5株、拟诺卡氏菌属（Nocardioides）2株，潜在新种1株。2、173株菌中共有6株菌株的发酵液具有抗菌活性，其中菌株GYM39-2对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、白念珠菌、新生隐球菌均有抗菌活性，发酵液对温度、光照的改变均有较好的稳定性，发酵液最适pH值范围为5-7之间。3、结合多相分类特