二穗短柄草bdgf14-c基因的克隆与表达分析

《二穗短柄草bdgf14-c基因的克隆与表达分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号学号M201171500学校代码10487密级硕士学位论文二穗短柄草BdGF14-c基因的克隆与表达分析学位申请人：王敏学科专业：遗传学指导教师：杨广笑教授答辩日期：2014年1月19日万方数据AThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceCloningandExpressionAnalysisofBdGF14-cinBrachypodiumDistachyonCandidate：WangminMajor：GeneticsSupervisor：Prof

2、.YangGuangxiaoHuazhongUniversityofScience&TechnologyWuhan430074,P.R.ChinaJan.,2014万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留

3、并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日万方数据华中科技大学硕士学位论文摘要自然界中植物的生长发育经常受到干旱、高盐、低温和重金属污染等非生物逆境以及各种病原微生物、虫害等生物逆境的影响。各种逆境胁迫严重影响植物生长发育，并造成作物的品质和产量下降。植物在长期的进化过程中已经形成了一

4、系列的生化和分子机制，通过这些机制调节自身的代谢和生长方式以适应逆境环境。研究植物对逆境胁迫的感应和耐受机制，对于作物抗性新品种培育具重要意义。14-3-3蛋白是一类由多基因家族编码的蛋白质，它通过与具有磷酸化的丝氨酸和苏氨酸残基的靶蛋白互作，调节多种生理过程中多种酶的活性，进而参与植物的代谢调控、生长发育和逆境反应等生命活动。目前有关新型单子叶模式生物二穗短柄草中14-3-3蛋白功能的研究鲜有报道。本研究从二穗短柄草中克隆到了一个14-3-3蛋白基因，并命名为BdGF14-c，对该基因表达特性与功能进行了初步分析,主要研究结果如下：（1）BdGF14-c基因的ORF长为7

5、71bp，定位于3号染色体上，含有5个编码的外显子；多序列比对发现该基因编码一个高度保守的14-3-3蛋白，证实BdGF14-c属于14-3-3超家族；通过进化分析发现该基因与水稻14-3-3蛋白的同源关系最近。（2）通过利用RT-PCR技术分析表明，BdGF14-c基因在二穗短柄草的根、茎、叶和颖果中均有较高水平的表达。（3）在各种逆境胁迫如低温、PEG、NaCl和信号分子如ABA、H2O2、MeJA处理下的二穗短柄草幼苗BdGF14-c基因的表达，分析结果发现，低温和MeJA处理下BdGF14-c基因的表达量下调，在MeJA处理下尤其显著。（4）构建BdGF14-c-G

6、FP融合蛋白表达载体，通过烟草表皮细胞瞬时表达分析，结果表明BdGF14-c在细胞膜、细胞质和细胞核中均有表达。上述研究结果为进一步深入研究BdGF14-c的功能奠定了基础。关键词：二穗短柄草；逆境；14-3-3；BdGF14-c；基因表达分析；亚细胞定位I万方数据华中科技大学硕士学位论文AbstractPlantsarefrequentlychallengedbyvariousbio-andabioticstressessuchasdrought,highsalt,lowtemperatureandheavymetalcontaminationaswellaspathog

7、enicmicroorganismsandpestsattacks.Stressesseriouslyaffectplantgrowthanddevelopmentandoftenresultindeclineinthecrops’qualityandyield.Plants,duringthelongprocessofevolution,haveformedaseriesofbiochemicalandmolecularmechanismstoregulatetheirmetabolismandgrowthpat