家蚕细胞周期蛋白cyclin+b3基因的克隆及其功能研究

《家蚕细胞周期蛋白cyclin+b3基因的克隆及其功能研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第一章文献综述指DINA复制的时期，只有在这一时期一JDR才能掺入新合成的EINA中，同时，染色体形成所必须的组蛋白．非组蛋白等物质也在此期合成．◎G2期(卿2)，指DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间，主要合成与有丝分裂中新细胞所必须的物质，如作为细胞骨架重要成分的微管蛋白等．④M期又称D期(InitosisordiviSion)，细胞分裂开始到结束，细胞染色体形成并发生细胞分裂，新细胞在此期形成。从增殖的角度来看(图1．1)．可将高等动物的细胞分为三类：①连续分裂细胞．在细胞周期中连续运转因而又

2、称为周期细胞，如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。②休眠细胞暂不分裂，但在适当的刺激下可重新进入细胞周期，称Go期细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。③不分裂细胞，指不可逆地脱离细胞周期．不再分裂的细胞，又称终端分化细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等等。C沧期细胞和终末分化细胞的界限有时难以划分，有的细胞过去认为属于终末分化细胞，目前可能被认为是(的期细胞，如家蚕的丝腺细胞，现已在体外成功培养了丝腺细胞系。图1．1细胞周期的四个阶段(b鲤；丛坠盟堕篮i!x￡壁堡醚Q匦笙迎!垒趑Q篮I!丛!：h刨)Figufe1．1

3、fourstag髂ofceHcycle1．2．2细胞周期的分子调控机制200l牟诺贝尔生理学与医学奖授予了美国科学家klandHa脚en和英国科学氍mothyHunt、PaulN啪e，以表彰他们发现了细胞周期的关键调节机制。1960SklandHarMell以芽殖酵母为实验材料，利用阻断在不同细胞周期阶段的温度敏感突变株(在适宦的温度下和野生型一样)．分离出了儿十个与细胞分裂有关的基因(celldivisi仰3西南大学硕十学位论文cyclegene，CDC)。如芽殖酵母的cdc28基因，在G2／lⅥ转换点

4、发挥重要的功能。H咖n还通过研究酵母菌细胞对放射线的感受性，提出了cl燃kp0面吐(细胞周期检验点)的概念【射，意指当DNA受到损伤时，细胞周期会停下来．1970sPaIIlN啷辩等人以裂殖酵母为实验材料。同样发现了许多细胞周期调控基因，如：裂殖酵母cdc2、cdc25的突变型和在限制的温度下无法分裂，w∞l突变型则提早分裂，而cdc25和w∞I都发生突变的个体却会正常地分裂．进一步的研究发现cdc2和cdc28都编码一个34KD的蛋白激酶，促进细胞周期的进行，而w∞l和cdc25分别表现为抑制和促进CD

5、C2的活性．1980年，Palll奈m雠的研究证明cdc2的产物能使细胞进入有丝分裂期f9J。1983年TilIl('myH吼t首次发现海胆卵受精后，在其卵裂过程中两种蛋白质的含量随细胞周期剧烈振荡，在每一轮间期开始合成。G2／M时达到高峰，M结束后突然消失，下轮间期又重新合成，故命名为周期蛋白(cyclin)‘埘。后来在青蛙、爪蟾、海胆、果蝇和酵母中均发现类似的情况，各类动物来源的细胞周期蛋白m】妣～均能诱导蛙卵的成熟。用海洋无脊椎动物和两栖类的卵为实验材料进行这类实验，好处在于卵的量比较大，而且在胚胎

6、发育的早期，细胞分裂是同步化的。1988年M．J．LDhl【a纯化了爪蟾的MPF，经鉴定由32KD和45KD两种蛋白组成，二者结合可使多种蛋白质磷酸化。后来PalllNu鼬(1990)进一步的实验证明P32实际上是CDC2的同源物，而∥是cycliIlB的同源物，目前，人们已经开始认识到c棚基因的表达产物P34cdc2和细胞周期素B形成的复合体是细胞周期调控的关键因子【ll，嘲．1995年前后，科学家们发现细胞周期运行中不仅受Cdl(一cycliII的调节，还受例如P2l、p27、P16和P15等细胞周期

7、素依赖性蛋白激酶抑制物(cycHn却endentl(ina∞iIll曲itor，CⅪ)调节11扣阚．此外，视网膜母细胞瘤基因(retinobl笛t伽嗯g饥e，兄B)和丹3也是细胞周期的监控因子，控制着细胞周期的运转，这些因子调节因子与增殖，分化、死亡等都有关系。1．2．2．1细胞周期调控因子和调控点细胞周期调控的关键因素是细胞周期依赖性蛋白激酶(cyclill_dependentkiIl勰陷，CDKS)，他们各自在特定的细胞周期被激活。CDl(s的功能的实现还依赖于细胞周期蛋白(Cychn)．Cyclin

8、在不同的细胞周期表达量不同，但CDl(S的蛋白总域在整个细胞周期进程中几乎稳定不变fm。CDK的活性除了受cycliIl的正向调节外，还受依赖蛋白激酶抑制剂(cyclin．dep明dentl【ina∞iIlllib“orS，CKIs)的负调节【1引．细胞周期的运行有两个主要调控点，亦称为检测点，一个处于G1／S转折点，是控制细胞进入s期的检测点：另一个处于G2／M转折点．是控制细胞进入M期的检测点。一般情况下，各种内外信号通过