水稻oscbp20基因的克隆与功能分析

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1、万方数据CloningandFunctionalanalysisofgeneOsCBP20inRiceByzhouchaoDirectedby-Prof．XuZhengjunADissertationSubmittedinPartialFulfillmentofRequirementsfortheDegreeofMasterInSichuanAgricultureUniversity(BiochemistryandMolucularBiology)ChengduSichuan，China610000May2014万方数据论文独创性声明lIIIIIIIIIIIi111

2、IIIIIIIIJ0120834本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我～同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：厨跫幽，够年g月n关于论文使用授权的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或

3、扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川I农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。函本论文不保密。口本论文保密，在一年解密后适用本授权。(请在以上口内划“√”)研究生虢J习盟导师签名山Ⅳ年幽，咋年6月厂日‘月，日万方数据摘要非生物逆境影响着水稻的生长、谷物产量与品质，探究不同的逆境信号转导通路对于确保水稻稳产与品质具有非常重要的意义。RNA结合蛋白(RBP)是植物体内一种重要的蛋白质，已经证明它们参与多种逆境下RNA的转录后调控。本文利用聚合酶链式反应从水稻cDNA文库中克隆到一个逆境应答基因，包含一个典型的RNA识别模块(RRM)，

4、编码核帽结合蛋白复合体的20kDa亚基，因此命名为OsCBP20。该基因开放阅读框编码243个氨基酸，预测分子量28．6kDa，等电点5．14。亚细胞定位发现OsCBP20定位在细胞核。半定量RT-PCR分析不同逆境下OsCBP20的表达情况，高温、高盐、干旱诱导该基因表达。融合蛋白表达分析，OsCBP20在大肠杆菌体内高效表达。原核表达逆境分析显示，重组细胞在高盐、干旱、高温条件下生存率比对照细胞高。对T2代转基因水稻植株进行盐胁迫、干旱胁迫以及高温胁迫处理后发现，过量表达水稻植株的存活率明显高于反义抑制表达水稻植株和对照日本晴植株。这说明，OsCBP20可能参与

5、高盐、干旱、高温逆境信号的转导，是一个多逆境调控基因。关键词：水稻；RBP；OsCBP20；原核表达；逆境处理万方数据AbstractRecentlNabioticstressesconstantlyaffectriceyieldsandexploredifferentstressessignaltransductionpathwayshaveaveryimportantsignificancetoimprovericeproductionandquality．RNAbindingprotein(RBP)isanimportmentproteininplants，w

6、hichhasbeendemonstratedthatinvolvedintranscriptionalregulationunderdifferentabioticstresses．ThisarticlehasclonedanabioticstressresponsegenefromriceeDNAlibrarybyPCR，whichcontainsacanonicalRNArecognitionmotif(RRM)andencodesnuclearcapbindingproteincomplex20kDasubunit，namedOsCBP20geneencod

7、esproteinof243aminoacidswithacalculatedmolecularmassof28．6KDaandaPIof5．14．SubeellularlocalizationfoundOsCBP20positioningi11thenucleus．Semi—quantitativeRT-PCRanalysisofOsCBP20expressionunderdifferentstressfoundthathighsalt、hil曲temperatureanddroughtinducedgeneexpression．Fusionproteinex