nogo-a在晶状体损伤促进视神经损伤后再生中的作用的相关研究

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterPrevalencestudyontheeffectofNogo-AonlensinjurypromotingregenerationafteropticnerveinjuryinratsByXiaoweiMuSul：Prof．YongLiiSupervisor：ProYongLOphthalmology．Ik一一TheFirstAffiliatedHospitalofZhenzhouUniversityMay2012’}原创性声明本人郑

2、重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。⋯文作弼日期砂／妊j月岁。日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索

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4、及寻找有效方法促进视神经再生是广大学者研究的焦点。传统观点提出，成年哺乳动物的中枢神经损伤后没有再生能力而只有再生反应【lJ，Aguage在实验中发现，将坐骨神经移植到视网膜，可明显提高神经节细胞(Retinaganglioncells，RGCs)的存活率，从而促进损伤后的视神经修复再生，这一实验证明视神经损伤后可再生。近年来的大量实验研究发现，损伤视神经的同时损伤晶状体，并成功观察到损伤后的晶状体形成外伤性白内障，可成功提高视网膜神经节细胞的存活机率，从而促进视神经的修复再生。Fischerl2]与Leon两个小组的研究工作表明其可能的机制与神经营

5、养因子(NGF、BDNF、哪等)、局部炎症、晶状体蛋白等有关。近年来，随着髓鞘相关抑制分子Nogo．At31、MAGt4]-ts]、OMGP[61等相继被证实，晶状体损伤对视神经损伤后再生的促进作用的机制是否与这些神经生长抑制因子有关报道很少，本实验拟对此相关机制进行探讨。目的观察单纯视神经损伤及视神经损伤联合晶状体损伤后视神经中Nogo．AI摘要mRNA及Nogo．A的表达，探讨晶状体损伤促进视神经损伤后再生的机制方法实验动物选取Wistar大鼠，共66只。随即分为三组：A组：正常对照组(6只)；B组：单纯视神经损伤组(30只)；C组：视神经损伤联

6、合晶状体损伤组(30只)。分别于7d、14d、21d处死大鼠2只(A组)、10只(B组)、10只(C组)，光镜下观察视神经的病理变化，免疫组化染色检测Nogo．a表达情况，采用逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)，半定量分析不同组视神经Nogo—AmRNA的表达诂甲皇日木1．视神经的少突胶质细胞中Nogo．a的表达损伤后7天，正常视神经对照组中，Nogo．A染色阳性的少突胶质细胞单行排列，排列规则，阳性细胞数为：117．40士2．84，呈淡蓝色。术后第7天，单纯损伤组神经纤维排列不规则，少突胶质细胞排列紊乱，阳性细胞数为：136．80士3．94，呈深

7、蓝色。视神经联合晶状体损伤组神经纤维排列不规则，少突胶质细胞排列错乱，阳性细胞数：130．40a：2．48，呈深蓝色。3组中N090-A表达阳性细胞数进行两两比较，除视神经损伤联合晶状体损伤组与单纯损伤组间差异无统计学意义(p：O．277)外，其余每两组之间的比较都有统计学意义。损伤后14天，阳性细胞计数在正常视神经组为：119．80a：4．45，单纯视神经损伤组为：128．40a：3．82，视神经损伤联合晶状体损伤组为：122．6a：3．23。单纯损伤组与正常喂养组比较差异有统计学意义(P<0．05)、联合损伤组与正常喂养组比较差异无统计学意义(P

8、=o．632)，单纯损伤组与联合损伤组之间差异无统计学意义(P-o．121)。损伤后21天，正常组阳性细胞数