甘油对猪冷冻精子细胞凋亡信号通路相关基因表达的影响

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1、万方数据SichuanAgriculturalUniversityMasterDegreeDissertationEffectsofGlycerolonApoptoticSignalingPathwaysrelated1●1^一J．’’genesduringBoarbpermatozoaCrVODreServatlonByLiDingDirectedbyAsso．Prof．ChangjunZengAnimalGenetic，BreedingandReproductionAnimalReproductiveBiotechn0109iesAgr

2、iculturalUniversity，No．46，XinkangRoad，Ya’an，Province，625014，P．R．ChinaJune，2014万方数据国家自然科学基金资助项目(30901028)TheNationalNaturalScienceFoundationofChina(No．30901028)本研究在四川农业大学“畜禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室”完成ThestudiedwerefinishedatFarmAnimalGeneticResourcesExplorationandInnovationKeyLa

3、boratoryofSichuanProvince，SichuanAgriculturalUniversity万方数据论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：丁面加毕年《，月7Z日关于论文使用授权的声明本人完全了解四川农业大学有关保

4、留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名：丁面导师签名：厉优／勺洲妒年易月，≥日加，多年f月，z日万方数据摘要人工授精技术已经广泛应用于养猪生产，但猪冷冻精液人工授精的使用率仅约1％。与新鲜精液人工授精相比，猪冷冻精液人工授精配种后受胎率降低，窝产仔数减少。冷冻过程使得精子质膜和线粒体膜损伤、膜的通透性发生改变、精子获能样变化以及诱

5、导精子细胞凋亡。尽管在冷冻稀释液成分及冷冻处理程序等方面做了大量研究，但关于猪精子的抗冻机制目前尚不清楚。因此，本研究从细胞凋亡的角度出发，系统分析冷冻保存过程中不同浓度甘油对冷冻．解冻后猪精子质量以及对细胞凋亡信号通路中相关基因表达以及Caspases蛋白酶活性的影响。结果如下：(1)低浓度甘油(2％、3％)处理组，猪精子的活力、活率均显著高于其它浓度处理组(0％、5％、7％、10％、14％)。(2)2％、3％甘油处理组的BCZ．2偿4×比值显著高于其它浓度处理组(O％、5％、7％、10％、14％)。猪精子BCL一2侣4Y表达量比值与Fa

6、s基因的表达量呈极显著负相关(厂=一O．929，P=O．007)。(3)3％甘油组中的Fas相对表达水平低于O％、2％、5％、7％、14％甘油处理组，且存在显著性差异。2％、3％甘油处理组FasL相对表达量显著低于O％和14％甘油处理组。(4)3％甘油处理组中Caspase．』相对表达量显著高于O％、2％、10％甘油处理组。Caspase．2基因在3％、t4％甘油处理组的表达量显著低于O％、2％、5％、7％、10％甘油处理组，而2％甘油处理组中Caspase．2的相对表达量显著高于其它甘油处理组(O％、3％、5％、7％、10％、14％)。对

7、于Caspase．6和Caspase一13基因，5％甘油处理组的表达水平显著高于其它甘油处理组(O％、2％、3％、7％、10％、14％)，而10％甘油处理组的表达量显著低于其它甘油处理组(O％、2％、3％、5％、7％、14％)。除10％甘油处理组外，3％甘油处理组中Caspase．8相对表达量显著低于其它浓度(2％、5％、7％、14％)甘油处理组。Caspase．8基因的相对表达量与BCL．2／BAX的比值呈显著性负相关(，_=一O．819，P=O．024)，而与Fas基因表达量呈显著性正相关(产0．786，P=O．036)。Caspase

8、．15相对表达量在0％甘油处理组显著高于其它浓度甘油处理组，lO％o禾n14％甘油处理组中Caspase一15相对表达水平显著低于其它浓度甘油处理组(O％、2％、3％、5％、7％