德保矮马精液品质分析及冷冻保存研究

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1、广西大学硕士学位论文德保矮马精液品质分析及冷冻保存研究姓名：郑自华申请学位级别：硕士专业：动物遗传育种与繁殖指导教师：韦英明；陆凤花20120628德保矮马精液品质分析及冷冻保存研究摘要本研究以，。。西德保矮马(公马)为研究对象，首先通过采集及分析不同季节矮马的精液品质，掌握德保矮马精液品质的季节变化规律，以指导冻精生产及德保矮马的繁育；同时，研究开发德保矮马精液冷冻保存配方，通过基础配方的研究、冷冻剂的选择优化、营养物质的替代、维生素的添加等方面，对德保矮马精液冷冻稀释液配方进行优化，以期获得更高的冻精质量；另外，通过人工授精试验，验证冻精在实

2、际生产应用的可行性，使之能广泛应用于矮马的保种和育种工作，迅速扩大矮马数量，保护这一濒危物种。取得的研究结果总结如下。1．通过综合评定其射精量、精子活力、密度、畸形率等指标的平均值，发现春季精液品质最好，且精子活力最高，畸形率也最低，其次是冬季、秋季，虽然夏季矮马射精量最大，但是活力低，密度小，畸形率高，精液品质最差，表明德保矮马精液品质呈现季节性差异。因此，冻精的生产制作保存最好选择在春季，以便能获得较高的精子冻后品质。2．比较了五种不同稀释液配方(配方编号分别为1、2、3、4、5)对德保矮马精液冷冻保存效果的影响。结果显示，配方2精子冻后活力

3、显著高于其他4种配方(P

4、照组相比，低浓度(1．5％、3．O％)的大豆卵磷脂组精予冻后活力与对照组无显著差异(P>0．05)；高浓度大豆卵磷脂组(4．5％、6．0％)精子冻后活力显著低于对照组(P

5、J-g／m1的维生素E，精子冻后活力、顶体完整率及体外存活时问显著高于不添加的对照组(P<0．05)，特别是精子解冻后体外存活时问大大延长了，但精子冻后运动速率及畸形率与对照组相比差异不显著(P>0．05)。而添加维生素C各浓度组的精子冻后活力、运动速率、畸形率、项体完整率与对照组都无显著性差异(P>0．05)，虽然解冻后精子体外存活时间显著高于对照组(P<0．05)，但提高程度不及添加维生素E的试验组。6．对冷冻精液的人工授精效果进行了研究。用经过优化后的德保矮马精液冷冻稀释液配方制作O．5ml规格的细管冻精，给16匹母马的22个情期进行了人工

6、授精，经直肠妊娠检查后，最后确定有7匹母马怀孕，总情期受胎率为31．8％。表明德保矮马冷冻精液能使母马成功受孕。尽管受胎率低，但这受多种因素影响，提高德保矮马冻配受胎率还有待进一步的研究。以上结果表明：(1)德保矮马精液品质受季节影响，春季精液品质最好；(2)德保矮马精液冷冻稀释液中添加5％DMF的效果优于6％的甘油，能替代甘油作为矮马精液冷冻保存的抗冻剂；而且添加600[ag／ml的维生素E能显著提高精子冻后质量；(3)优化后的德保矮马精液冷冻稀释液配方为：乳糖7．29、葡萄糖3．69、柠檬酸钠0．49、卵黄5．0ml、DMF5．0ml、维生素

7、EO．069、青链霉素各lO万单位(每100ml稀释液中的物质含量)；用该配方冷冻的德保矮马精液给母马进行人工授精后能使母马成功受孕。关键词：德保矮马精液品质精液冷冻抗冻剂大豆卵磷脂维生素QUALITYANALYSISANDCRYOPRESERⅥ姐IONOFDEBAOPONYSEⅣ匝NABSTRACTTheobjectofthisstudywastoanalysethesemenqualityofGuangxiDebaopony(stallion)indifferentseasons，SOastoguidetheproductionofsemen

8、cryopreservationandbreedingofDebaopony．Moreover，the—influencingfacto