牛冷冻精液的保存及解冻.doc

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1、牛冷冻精液的保存及解冻精液冷冻保存是将精液进行特殊处理，保存在超低温下，以达到长期保存的目的。通常采用液氮（-196℃）保存。其最大优点是可长期保存，使用不受时间、地域以及种用雄性动物寿命的限制。可充分提高公牛的利用率。现将冷冻精液保存和解冻的有关技术操作介绍如下。一、稀释液的配方：１２％的蔗糖液７５毫升、甘油５毫升、卵黄液２０毫升。二、稀释方法：将经过检查合格的精液（活力0.6以上、精子密度中等）按１：２-５倍稀释液进行稀释，其稀释原则应保证每个颗粒精液中所含精子数不少于3000-4000万个，解冻后呈直线前进运

2、行的精子不少于15000万个。三、冷冻：在装有液氮的容器上置一铜纱网，距液氮面２厘米左右，使温度维持在-80℃至-110℃。将平衡后的精液用滴管按一定量(0.1ml/滴)滴于铜纱网上，滴完最后一滴精液后，在液氮蒸汽中平衡３-５分钟后，当精液颗粒颜色变白时，立即浸入液氮，并将全部颗粒取下，收集于贮精瓶或纱网布袋内，并做好标记，然后立即移入液氮罐中贮存。四、解冻：取预先配制好的9%的柠檬酸溶液１毫升，放入干净的小试管中，再置于40℃左右的温水杯中，迅速取颗粒冷冻精液１粒放入试管，待颗粒三分之二融化后，从水杯中取出试管迅

3、速摇动使颗粒完全融化，接着检查精液活力，不低于0.3即为合格品。五、重视保精、快速解冻与镜检１、根据液氮罐的性能要求，定期添加液氮罐内盛装冻精的提筒不能露在液氮面外。２、取精时，尽可能用长镊子，切勿将提筒或纱布袋提到临界线以上处（罐顶１０厘米左右）。３、从液氮中取出细管冻精时，要轻轻甩１-２下，将塑料细管的棉塞端放入３５-４０℃的温水中，把封口端留在水外１-1.3厘米外，待管内精液融化一半时，立即取出备用。４、解冻后的精液镜检时，精子的活力不低于0.3方可用于输精，才能确保正常受精。５、解冻后的精液应立即输配，不宜

4、停放时间过长，应做到现解冻、现输精。