牙周脓肿专性厌氧菌耐药性研究

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1、复旦大学硕士学位论文牙周脓肿专性厌氧菌耐药性研究Drugresistanceofpredominantperiodontalabscessesanaerobes院系：复旦大学附属华山医院专业：口腔临床医学姓名：何俊霖导师：俞立英教授指导小组成员：常青胡付品陈嘉臻目录中文摘要1英文摘要3缩略词表5f!U56第一部分牙周脓肿专性厌氧菌的培养及鉴定91材料与方法92親163舰22第二部分牙周脓肿专性厌氧菌的药敏研究261材料与方法272323舰34第三部分牙周脓肿

2、耐药厌氧菌耐药基因的检测371材料和方法382■43346全文总结4950附录驗57攻读硕士学位期间发表的学术论文67麵68复旦大学硕士学位论文牙周脓肿专性厌氧菌耐药性研究中文摘要目的：研究牙周脓肿患者中检出的牙周优势厌氧菌，并对牙周厌氧菌分离株进行药敏分析及耐药基因检测，以期从基因水平为临床治疗牙周厌氧菌感染合理选用抗菌药物提供理论依据。方法：1.选取58例牙周脓肿患者（男23例，女35例）为研究对象。采用棉拭送检法取样后，应用简易厌氧袋培养法，经两至三次耐氧实验，培养

3、出纯代的牙周专性厌氧菌；以API20A生化鉴定法和聚合酶链反应（polymerasechainreaction,PCR)技术对分离出的牙周厌氧菌进行鉴定。2.根据美国临床实验室标准化协会(NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards)(NCCLS)推荐的琼脂稀释法参考方案（M11-A5)测定牙周厌氧菌对8种临床常用抗菌药物敏感性。3.依据药敏实验结果，筛查耐药菌株；采用PCR法，检测牙周厌氧菌株中耐药菌株的各型耐药基因。结果：1.简易厌氧袋培养法

4、分离培养的细菌具有良好的专性厌氧特性及传代增殖能力。经分离鉴定，牙周专性厌氧菌检出率为48.3%，其中以产黑色素普黑沃菌分离率最高。API20A生化鉴定技术和16sRNA序列测定技术鉴定牙周专性厌氧菌的一致率为82%。2.药敏试验结果显示，所有菌株对亚胺培南、头孢西丁、氯霉素100%敏感，对甲硝唑、克林霉素和头孢美唑耐药率分别为8%、36%和4%。1复旦大学硕士学位论文3.克林霉素耐药菌株中有3株检测出ermF，PCR法进一步证实其位点不在质粒上；甲硝唑耐药菌株中均未检测出耐药基因与质粒。结论?1

5、.产黑色素普雷沃菌是牙周脓肿患者厌氧菌群中的优势菌；生化法与分子生物法在鉴定细菌种属时具有一致性，证实其方法学上的可行性。2.牙周厌氧菌对抗菌药物的耐药性存在差异，作为口腔临床常用药物甲硝唑，细菌对其耐药性有所增长。治疗时应根据基因分型和药敏试验结果合理选用抗菌药物，以缩短疗程，提高疗效。3.耐药基因可通过多种机制及其相互作用形成复杂的耐药性，耐克林霉素菌株可检测出目的耐药基因，然而在质粒上未检测出；耐甲硝唑菌株中未检测出己知耐药基因，其耐药机制有待进一步深入探讨。关键词：牙周脓肿；牙周专性厌氧菌

6、；药敏试验；耐药基因中图分类号：R782复旦大学硕土学位论文英文摘要DrugresistanceofpredominantperiodontalabscessesanaerobesABSTRACTObjective:Thestudyaimstoprovidescientificbasisofantibiotictreatmentforperiodontalabscessesatthemolecularlevelbyisolatingandculturingpredominantanaerobesf

7、romtheperiodontalabscesses,performingantibioticsusceptibilitytestanddetectingdrugresistantgenesofthestrains.Methods:1.58periodontalabscessespatients,including23maleand35female,wereenrolledinthestudy.Theperiodontalabscessessampleswerecollectedandcultu

8、redwithanaerobicbags.Afterverifiedtwotothreetimessensitivetooxygen,thesinglecoloniesoftheperiodontalanaerobeswereisolatedandpreserved.ThestrainswerethenidentifiedbybothAPI20ABiochemicalmethodand16SPCRmethod.2.Theantibioticsusceptibilitytestto