安徽省鸡j亚群白血病血清学调查及毒株分离鉴定

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1、安徽农业大学硕士学位论文安徽省鸡J亚群白血病血清学调查及毒株分离鉴定姓名:安好峰申请学位级别:硕士专业:预防兽医学指导教师:李福宝;张丹俊201205摘要禽J亚群白血病是由禽J亚群白血病病毒(AvianLeukosisVirussubgroupJ,ALV—J)引起的鸡骨髓细胞瘤病(Myelocytomatosis,ML)。自1988年PayneL等在肉鸡中发现ALV—J以来,世界许多地区不断有ML病例报道。我国1999年首次从商品肉鸡中检出ALV—J,随后ALV—J在全国蛋鸡、肉鸡和地方品种(系)鸡报道日渐增多,可见

2、ALV—J己在我国鸡群中广泛存在。为详细了解J亚群白血病在安徽省鸡群中感染状况,本研究从安徽省不同地区的22个鸡场随机采样890份,通过ELISA试剂盒进行ALV—J血清抗体检测。结果显示不同地区、不同品种(系)、世代、性别和周龄的鸡群中均存在ALV—J的感染,全省抗体阳性率为9.9%。江南地区鸡场抗体阳性率100%,江淮地区抗体阳性率是71.4%,抗体阳性率为60.O%。地方品种(系)鸡抗体阳性率为18.8%,肉鸡感染为8.2%,蛋鸡抗体阳性率为5.9%。商品代鸡群的抗体阳性率是10.8%而父母代的抗体阳性率为9.

3、5%,公鸡的抗体阳性率为12.6%而母鸡抗体阳性率是9.1%。雏鸡、青年鸡抗体阳性率高于成年鸡。通过接种DF一1细胞和聚合酶链式反应(PCR),从安徽省太湖县某肉种鸡和安徽省宿松县某商品代蛋鸡中各分离到l株ALV—J毒株,分别命名为AHll01株和AHll02株;两分离毒株鲁邛5氨基酸序列与各亚群参考毒株序列进行序列分析,与A至E亚群禽白血病毒株的酗5氨基酸序列同源性介于9.3%~29.7%之间,与J亚群参考毒株同源性为82.1%~99.4%。分离毒株AHll01与J亚群原型毒株HPRS—103氨基酸同源性为97.1

4、%,与国内山东J亚群毒株SD09TA04和SDYC02J氨基酸同源性均是99.4%;序列分析显示碱基和氨基酸突变率分别为1.0%和为6.5%。蛋鸡分离毒株与HPRS一103氨基酸同源性最高为89.0%;碱基和氨基酸突变率分别为8.0%和为9.1%。两分离毒株之间同源性为85.4%,二者之间碱基有48个突变和6个缺失,氨基酸有26个变异和3个缺失。碱基和氨基酸突变或缺失多在高变区hrl、hr2和可变区vr2、vr3内及它们的附近区域。遗传进化分析表明,分离毒株AHll01与山东毒株SD09TA04和SDYC02J可能来

5、源相同,分离毒株AHll02可能为变异的重组毒株,两分离毒株亲缘关系较远。本研究通过系统的血清学调查,确定ALV—J在安徽省内不同地区、不同品种(系)、世代、性别和周龄的鸡群中普遍存在,感染强度不一。分离得到的两株ALV—J毒株为安徽省ALV—J的分子流行病学研究和ALV—J的防控研究提供了理论依据和物质基础。关键词:ALV.J,血清学调查,分离鉴定,序列分析ABSTRACTSubgroupJaviall1eukosisincMckensisamyelocytomaIosisinducedbyALV-J(AVian1

6、吼lkosisViruSsubgroupJ).LotsofcaSeswerereportedsinceALv.JwaLsdiscoveredinmeat-typecMckensin1988byPa),11eLa11dlliscoInpallions.1111999,ALV.Jwasdetectedfirst丘omcommercialbroilerinChjna,廿lenALv-JwaSreportedthroughouta】lt11ecountry,not011lymeat—typecllickensandegg-t

7、),pec11ickens,alsolocalc11ickenf-ounds吣s,吐lephenomenonindicatedmatAIV-JhadexiSted淅delvinCllina.T0obtaindetailedmessageofpLLV二J,wehadgameredrandomlysanlpleof890from22fjmsofma’erentareaSiIlAnblliprovince,haddetectedsemmantibodyagainstALv-JbvELISA虹t.nleresuJtsshow

8、edmatdi虢rentregions,di毹rentvarieties(1i11es),di恐rentgenemtions,di侬鹏ntgendersanddi&rentagesinc11ickenswereprevalencepositiveiIIf.ectionofAIV-J.Di航rentc11ickens、Ⅳeredi岱:rentde

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