核盘菌菌株snz1-3-5中携带病毒的初步研究

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1、华中农业大学硕士学位论文核盘菌菌株SNZ1--3--5中携带病毒的初步研究姓名：李艳申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：姜道宏201206核盘菌菌株SNZI．3．5中携带病毒的初步研究摘要真菌病毒在真菌群体中分布广泛，筛选和鉴定新的真菌病毒可以为研究真菌病毒的分子进化、生态及与其寄主互作提供丰富生物材料。本论文主要以从陕西省汉中市南郑县油菜病残体的菌核上分离获得的菌株SNZl．3．5为研究材料，对该菌株的生物学特性及其所含真菌病毒进行了初步分析。研究结果如下所述：以不携带真菌病毒的菌株Ep一1PNA367作对照，发现菌株SNZl．3．5的生长速率减缓，产草酸能力下降，而菌

2、落形态无明显变化。对油菜叶片的致病力测定表明，菌株Ep．1NPA367在接种接种24h可在叶片产生病斑，48h病斑平均直径为3．2cm；而菌株SNZl．3．5在接种24h叶片上未见病斑形成，48h时病斑平均直径为1．5cm。因此，菌株SNZl．3．5是一株弱毒菌株。检测发现菌株SNZl．3．5至少含有2条dsRNA片段，大小分别约为9．0kb和5．0kb，分别命名为SL—dsRNA和SS—dsRNA。经过eDNA克隆和生物信息学分析，发现SL—dsRNA的已知序列与核盘菌真菌病毒SsHWSZ一150基因组同源性达到97％与核盘菌弱病毒1(Scleritiniasclerotior

3、umhypovirus1，SLHVl／SZ．150)属于同一病毒种的不同株系，命名为SsHVl／SNZl—3—5。SS—dsRNA的已知序列与隶属于全病毒科的盾壳霉RNA病毒(ConiothyriumminitansRNAvirus，CmRV)基因组对应序列同源性达到55％，命名为核盘菌全病毒1(SclerotiniasclerotiorumTotivirus1／SNZl．3．5，SsTV．1／sNZl．3—5)。分析菌株SNZl．3—5原生质体再生菌株，筛选获得了一株仅含有SsTV-1，而不含SsHVl的再生菌株SNZlR20。生物学特性分析，发现菌株SNZlR20菌落形态与出

4、发菌株有显著差异，如气生菌丝多，菌丝顶端卷曲等；致病力测定显示菌株SNZlR20对油菜叶片完全失去致病力。关键词：核盘菌；真菌病毒；弱病毒；全病毒；弱毒现象华中农业大学2012属硕二{二学位论文AbstractMycoviruses(orfungalviruses)arewidelyspreadinthefungalkingdom．Thediscoveryandcharacterizationofmorenovelmyeovirusesmightsupplyabundantviralmaterialtoresearchtheorigin，ecologyandevolutionar

5、ypathwaysofmycoviruses．Inpresentstudy,thebiologicalcharacterizationoftwomycovirusesandtheirhostSclerofiniasclerotiorumstrainSNZl—3—5，isolatedfromadiseasedrapeseedplantatShanxiprovince．wereanalyzed．Theresultsofpresentstudyaregivenbelow：ComparedwiththecontrolstrainwithoutcarryingthefungalvirusE

6、p一1PNA367。wefoundthatthegrowthrateandtheproductionofoxalicacidcapacityofthestrainsSNZl—3-5significantlydecreased．whilecolonymorphologyofSNZl一3-5wassimilartothatofstrainEp一1PNA367．VirulencetestonthedetachedleavesofrapeseedrevealedthatstrainEp-·1PNA367couldcausetypicaldiseasedlesionsat24hourspo

7、st-inoculation(hpi)anddevelopdiseasedlesions谢th3．2cmindiameterat48hpi，whereasstrainSNZl—3-5couldnotcausediseasedlesionat24hpianddevelopdiseasedlesionswith1．5cmindiameterat48hpi．Therefore，strainSNZl～35isahypovirulentstrainofS．sclerotiorum．Weal