成人骨髓间充质干细胞体外多向分化潜能特性的研究

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1、维普资讯http://www.cqvip.com中国危重病急救医学2005年2月第17卷第2期ChinCritCareMed，Feb．2005，Vo1．17，No．2·95··论著·成人骨髓问充质干细胞体外多向分化潜能特性的研究常颖齐欣l、丽莎徐忠信【摘要】目的研究体外不同诱导条件下成人骨髓间充质干细胞向成骨细胞、脂肪细胞、神经细胞分化的能力。方法用细胞化学方法对诱导后的骨髓细胞进行脂肪细胞特异油红0染色；VonKossa及改良的钙钴法进行成骨细胞鉴定；免疫组化方法检测诱导后的骨髓细胞神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白一M(NF—M)、胶质纤维酸性

2、蛋白(GFAP)表达。结果在不同的诱导条件下，诱导后的细胞油红O染色胞浆内可见橙红色脂滴；VonKossa染色可见细胞间布满黑色颗粒，提示有矿化基质沉积；改良钙钻法碱性磷酸酶染色胞浆呈深棕色或深黑色。免疫组化染色显示向神经细胞方向诱导后细胞NSE(+)、NF—M(+)、GFAP()。结论成人骨髓间充质干细胞在体外具有多向分化的潜能。【关键词】骨髓间充质干细胞；成骨细胞；脂肪细胞；神经细胞StudyonmultipOtentialdifferentiationofhumanbonemarrowmesenchymalstemcellsinvitroCHAⅣGY

3、ing·QIXin，BUL—sha，XUZhong—xin．DepartmentofNeurologySino—JapaneseF，‘iendshipHospital，JilinUniversitY。JilinI30031，Jilin，China[Abstract]ObjectiveTostudythecapabilityofhumanbonemarrowmesenchymalstemcells(MSCs)todifferentiateintoadipocyte，osteoblasts，andneurocytesunderdifferentexperime

4、ntalconditionsinvitro．MethodsTheinducedhumanbonemarrowMSCswereexaminedbycytochemistrystainingandimmunohistochemistrystaining．ResultsInducedhumanbonemarrowMSCsformedalkalinephosphatase—positiveaggregatesandVonKossastain—positivenodulesundertheconditionofosteogenicdifferentiation．Un

5、dertheconditionofadipogenicdifferentiation．theisolatedhumanbonemarrowMSCsformedoilred一0一positivecells．ImmunohistochemistryresultsshowedthatdifferentiatedhumanbonemarrowMSCSexpressedneuron—specificenolase(NSE)andneurofilament(NF—M)．ConclusionHumanbonemarrowMSCshavethecapabilityofmu

6、ltiDotentialdifferentiationinvitro．[Keywords]honemarrowmesenchymalstemcell；osteohlast；adipocyte；neurocyte间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs)培养基(DMEM)、高糖一DMEM(H—DMEM)均购是来源于中胚层的具有多向分化潜能的干细胞，主自GibcoBRL公司；胎牛血清(FCS)、碱性成纤维细要存在于全身结缔组织和器官间质中，以骨髓组织胞生长因子(bFGF)、HEPES缓冲液购自Hyclone中含量最多，胎儿脐血中亦可分离

7、得到。在一定的公司；胰蛋白酶、Ficol1分离液(密度1．077g／I)、地诱导条件下，MSCs具有向成骨细胞、成软骨细胞、塞米松、一甘油磷酸钠、维生素C、3一异丁基一1一甲成肌细胞、肌腱细胞、脂肪细胞等中胚层细胞分化的基黄嘌呤(3一isobutyl一1一methyl—xanthine，能力；同时可以向外胚层的神经细胞及内胚层的肝IBMX)、消炎痛(indomethacin)、p一巯基乙醇购自卵圆性细胞分化。本实验中通过研究成人骨髓Sigma公司；牛胰岛素购自Calbiochem公司；鼠抗MSCs(hMSCs)在体外不同诱导条件下向成骨细人坤经元特异性烯醇

8、化酶(NSE)、神经丝蛋白一M胞、脂肪细胞、神经细胞分化的能力，进