金标法与酶联免疫法检查两对半的比较

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1、金标法与酶联免疫法检查两对半的比较左长华蒋磊（江西省监狱局中心医院检验科330100）【中图分类号】R446［文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）40-0065-01【摘要】目的探讨金标法在两对半的检测中的价值和可靠性。方法用金标法与酶联免疫法对标木进行检测比较。结果用两种方法测得例大三阳结果完全一样，61例小三阳有3例第四项没有检出，符合率95.1%o结论金标法检测两对半快速简单，更适合急诊检验和快速筛查。近年两对半试剂盒的灵敏度有了明显提高。两对半检测己成人们的日常体检、血液中心采血体检、急诊手术及急诊

2、输血后的常规检查项目，以达到对乙肝早诊断、早预防、早治疗，减少门诊患者等待时间的目的。目前实验室普遍使用的酶联免疫（ELISA）法检测时间长，较为繁琐，乂不便急诊检测。因此，我们选用金标快速检测板（金标），该法具有简便、快速、特异性高，无需检测仪器，可单样木快速检测的特点，现将两方法对比结果报告如下。1材料和方法1.1材料来自2011年1月一2011年8月门诊患者，共计506人，年龄口〜49周岁，其中男289人，女217人。一次性无菌采血器采集静脉采血，两小时内分离出血清。金标法检测试剂盒由艾康生物技术（杭州）有限公司提供，批

3、号201011456c酶联免疫试剂盒由北京万泰牛物药业股份有限公司提供，批号20100502c酶标仪为美国宝特公司提供，型号为ELX-800型，洗板机为美国宝特公司提供，型号为ELX-50型。1.2方法1.2.1ELISA-步法检测，严格按说明书操作，洗板机洗板，酶标仪450/630nm,双波长比色,以S/C0值判定结果。1.2.2金标法乙肝两对半快速检测板是采用层析法检测乙肝病毒五项血清学标志，HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAbo其中HBsAg、HBeAg检测试纸条采用双抗体夹心法，测抗原：固定于膜上

4、测试区(T)的多克隆抗体+标本中待测抗原+金标记的特异性单克隆抗体显色和控制区(C)的相应抗体。HBsAb检测试纸条采用双抗原夹心法,在膜上测试区(T)有被事先固定的乙肝表面抗原和控制区(C)的相应抗体。滴加适量血清标本于试剂板加样处，不宜过多以免造成污染，不宜过少否则造成假阴性。在测试区(T)和控制区(C)均有红色条带出现为阳性，在测试区(T)不出现红色条带，而控制区(C)内出现红色条带为阴性结果。HBeAg、HBeAb此两项在检测试纸条上采用了竞争抑制法，试纸条膜上测试区(T)会有单克隆抗体和控制区(C)相应抗体。测试时滴

5、入适量标本血清于试剂板加样处，如标本中含有相应抗体，则同膜上测试区(T)的单克隆抗体竞争与预包被在乳胶颗粒上的相应抗原反应。如标本中没有相应抗体，预包被在乳胶颗粒上的相应抗原则同膜上测试区(T)内单克隆抗体全部结合。强阳性标本测试区(T)没有红色条带，弱阳性则将出现一条较浅的红色条带，阴性标本测试区(T)内将会出现明显的红色条带。质控区(C)无论是阳性或阴性标本，都会出现一条红色条带，是判定是否有足够标本，层析过程是否正常，测试板是否失效的标准。本测试板在15分钟内读取结果，20分钟后判定结果无效。2结果416例标本结果如下，

6、并经配对t检验。3讨论20世纪70年代初，Fankl等建立了免疫胶体金技术，开始作为一种免疫标记技术而被使用，随后逐渐广泛用于免疫检测技术。各种金标检测条、检测卡已广泛被应用。通过对506例标本的比较分析，金标测试板有1例HBsAg于15分钟内未能检出,该例标本ELISA法检测为HBsAg、HBeAb阳性。HBsAg显色较淡，S/C0值为0.992,可能是由于抗原滴度较低，金标法未能检出。其他各例均于10—15分钟内得出结果，且与ELISA法所得结果完全相符。ELISA法在临床实验室已得到普遍应用，特别是用于各种肝炎标志物的检

7、测，但ELISA法需时较长，其主要原因是由于液相中的抗原(抗体)需经扩散才能与固相上的抗原或抗体反应。但作为基层医疗单位、医院急诊病人和手术前的应急的单个标本检测，包括现在的血站的流动采血点献血员的快速筛检是根本无法用ELISA法来实现的。金标法与ELISA法比较，金标法敏感性和特异性、重复性和稳定性较佳，准确性也较好，但金标法的敏感性较ELISA法差。故在实际应用中，根据实际情况两种方法联合起来，特别是在血液中心在无偿献血采血检测时可用金标法作为初筛，这样可大量的节约时间，更快速、准确地为病人服务。参考文献[lJFaulkM

8、p,TayloyCM.Animmunocollocolloidalmethodfortheelectronmicroscope」mnunoChemistry.19718:1081-1083.⑵翁厚光.乙肝病毒表面抗原联合检查在消化内镜中的应用.[J]临床和实验医学杂志，200