芦荟中芦荟苷的提取、纯化及生物活性的研究

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1、上海海洋大学硕士学位论文芦荟中芦荟苷的提取、纯化及生物活性的研究姓名：徐蓉申请学位级别：硕士专业：水产品加工及贮藏工程指导教师：李燕20080105上海海洋大学硕士学位论文芦荟中芦荟苷的提取、纯化及生物活性的研究摘要芦荟苷是芦荟中的一种主要的生物活性成分，属于葸醌类化合物，主要存在于芦荟叶片底部表皮附近。本文旨在建立从库拉索芦荟中分离纯化芦荟苷的方法，并研究其抑菌及抗氧化活性。提取：研究超声波法提取库拉索芦荟中芦荟苷的工艺条件。通过对提取时间，提取温度，料液比，乙醇浓度的单因素实验，确定了提取芦荟粉末中芦荟苷的条件，N过Lg(34)正交实验，以芦荟苷得率作为

2、考察指标，进一步优化工艺条件。结果表明：提取工艺为：乙醇浓度80％，提取时间为45min，料液比为l：25，提取温度45℃。按照该提取工艺提取，芦荟苷的提取率为11．18mg／g。在确定了该提取工艺的基础上，研究了酸化条件、超声波输出功率、提取级数对提取率的影响。结果表明：醋酸浓度为lmoL／L，室温条件下酸解30min，功率360W，提取三次，芦荟苷的提取率为14．9mg／g。纯化：研究了6种大孔吸附树脂对芦荟苷的静态吸附和动态洗脱性能，结果表明：在所选的树脂中HZ．801型树脂吸附与洗脱效果最佳。优化出的最佳工艺条件为：在上样浓度为0．2765mg／mL

3、的条件下，上样体积为520mL，洗脱速度2mL／min，先用双蒸水洗涤至流出液为无色，再用lO％的乙醇溶液洗涤至流出液为无色，后用3BV60％7",醇溶液洗涤并收集洗脱液，得到芦荟苷溶液，经浓缩、冷冻干燥后，进行纯度分析。在此条件下芦荟苷纯度为10．16％，纯化倍数达到14．72，回收率为86．3％。将粗分离物进一步过层析硅胶柱精制。选择几种不同体积比的展开剂，通过TLC法观察展开效果，最终确定乙酸乙酯：甲醇(6：1)为最佳的展开剂，柱色谱条件为：硅胶柱规格为(20x400mm)，上样量为0．05439，流速一秒一滴，每20mL收集一管，用TLC法追踪检测芦

4、荟苷流出的位置，收集含有芦荟苷的流出液，浓缩，冷冻干燥。得到芦荟苷精制品。对精制品进行定性检测——Bom昀gers反应和红外吸收光谱检测。结果表明：Borntragers反应中，醚层由黄色褪为无色，氢氧化钠层显红色，表明有芦荟苷存在；精制品与芦荟苷对照品的吸收光谱很相似，匹配度达到了90．86。另外，初步研究了高速逆流色谱法对芦荟苷的纯化。结果表明：在进样10min后丌始出峰，几个峰清晰可见，没有重叠也没有“毛刺”，有效成分得到了完全的上海海洋大学硕士学位论文分离。收集各峰所对应的流出液，用TLC法检测，确定芦荟苷溶液流出的位置。活性：将提取的芦荟苷进行抑菌

5、及抗氧化活性实验，采用牛津杯法研究芦荟苷的抑菌性，结果表明：当芦荟苷的质量分数为0．8％时，对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌有轻微的抑制作用。采用DPPH法和超氧阴离子自由基(02’一)清除法研究芦荟苷的抗氧化活性，结果表明：DPPH法中，在样品浓度均为O．125mol／L的条件下，抗坏血酸对DPPH溶液的抑制率达到了90％以上，粗品抑制率为22．29％，粗分离物抑制率为51．94％，而芦荟苷精制品及对照品的抑制率仅为12．47％和3．99％。超氧阴离子自由基(02’一)清除试验中，粗品经过大孔树脂分离纯化后，对02’一清除的IC50值由21．80m

6、g／mL提高到了4．17mg／mL。关键词：芦荟苷，超声波提取，大孔吸附树脂纯化，硅胶柱，高速逆流色谱，活性试验上海海洋大学硕士学位论文StudiesonExtractionandPurificationofAioinfromaloeandItsBio．．activitiesABSTRACTAloinwasanimportantbio．activecomponentinaloe．belongingtotheanthraquinones，mainlYinthevicinityofaloeleavesatthebottomoftheepidermis．Thist

7、hesisistoestablishtheoptimumextractionandpurificationconditionsofA10infromAloebarbadensisandstudyitseffectsonantibacterialandantioxidantactivity．Extraction：AloinwasextractedbyusingUltrasonic．Theextractiontime．extractiontemperature．1iquidratio，concentrationofethanolsingle—factorswer

8、etestedtoconfiITntheextrac