现代柱层析技术在中药提取中的作用

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1、现代柱层析技术在中药提取中的作用解红艳吴建宇（GEHealthcare(通用电气医疗集团)中药化学成分及其复杂,若要从复杂的混合物中提取对人体有效的单一中药活性成分,使用传统的方法很难达到高纯度。但灵活综合地应用各种层析技术，如正相层析，离子交换。分子筛，反相层析，逆流色谱，为中草药的提取提供了一个有效的技术平台。层析技术具有重复性好，可在线检测，纯度高，易于产业化，易于自动化，是科学研究和工艺开拓的首选方法。关键词：SephadexLH-20SepharoseQ，SepharoseSP，Spurce15RPC一．应用

2、于中草药纯化的凝胶简介（一）SephadexLH-20国内外有很多利用SephadexLH-20纯化天然产物的文献报道。可纯化的天然产物有甙、生物碱、黄酮、内酯、多酚，有机酸及甾类等化合物。虽然SephadexLH-20通常被认为是凝胶过滤的胶，由于它是SephadexG-25交联羟丙基而成。它除了具有凝胶过滤作用以外，它还同时具有吸附层析和分配层析的性质。吸附层析依赖于被分离化合物与凝胶之间的氢键的数量和质量；分配层析依赖于被分离化合物在流动相（溶剂）和固定相（凝胶）之间的分配，这主要由样品的极性和溶剂的极性决定的。

3、可利用的有机溶剂通常有丙酮，乙酸已酯，氯仿，三氯甲烷，和四氢呋喃等。（二）离子交换SepharoseFF/HPQ,SP,DEAE,CMSepharoseFastFlowQ,SP,DEAE,CM离子交换介质是以琼脂糖为架的离子交换介质，具有高流速加上高载量，同时具有高化学稳定性。（三）反相层析SourceRPCSourceRPC是已聚苯乙烯为基架的新一代反相填料，具有极强的化学稳定性，可耐受强酸强碱，兼容pH1－12，可用1MNaOH在位清洗和消毒，使用寿命长，疏水性和C18相近，不仅分辨率高，选择性宽，载量高，颗粒均匀

4、；而且高流速低反压，非常容易放大。而一般的反相硅胶具有不耐碱，高反压，难装柱，不易放大的特点。（四）硅胶硅胶Silica正相层析是植物化学和中药化学的主流技术，应用非常广泛，是最经典的分离纯化技术。二．SephadexLH－20纯化中草药有效成分5/51．利用SephadexLH-20纯化黄酮类物质及黄酮甙黄酮类化合物是泛指两个苯环通过三个碳原子相互联结而成的系列化合物，广泛存在于天然植物中。在植物体内大部分与糖成甙，一部分以甙元形式存在，大多数呈黄色或淡黄色。它的生理作用也多种多样。利用SephadexLH-20纯化

5、黄酮类物质最经典的例子是对橙皮素，山奈酚和槲皮素的分离。灯盏花具有治疗脑血栓形成、脑栓塞、多发性神经炎等脑血管意外所致的瘫痪症。现在的中药均是以其总黄酮作为药效成分，利用SephadexLH-20结合其它方法就可以将其四种不同的黄酮类物质分开。它们是灯盏乙素（scutellarin）、5，6，4‘-三羟基黄酮-7-0-β-D–半乳糖醛酸苷、灯盏甲素和黄芩素7-0-β-D–吡喃葡萄糖苷2。为进一步探索其生理机制奠定了基础。另外，梁鸿和赵玉英3等人利用SephadexLH-20将柴胡中的八种黄酮类化合物分离。它们是柴胡色原

6、酮酸、芦丁、槲皮异鼠李素、异鼠李素3-葡萄糖甙、葛根素、7、4’-二羟基-异黄酮-7-葡萄糖甙、色氨酸。台湾科学家4在LoranthusKaoiKiu叶中分离出八种黄酮类物质。它们是1、儿茶素的混合物2、表儿茶素3、2‘，4’，6‘-三羟基二氢黄酮4’-0-β-D-乳糖甙，4、松烯柏素-7-o-β-D-乳糖甙5、山奈酚-3-0-α-D-鼠李糖甙6、山奈酚3，7-二-0-β-D乳糖甙7、槲皮素3-0-α-D-鼠李糖甙8、槲皮素3-0-β-D乳糖甙。在工艺中，有两步使用SephadexLH-20。下图！为使用Sephade

7、xLH-20纯化40%大豆异黄酮的浸提混合物，一步就可得到纯度90%以上的大豆异黄酮。下图2为使用SephadexLH-20纯化红色黄花素图1：SephadexLH-20纯化大豆异黄酮图2：SephadexLH-20纯化红色黄花素2．利用SephadexLH-20纯化皂甙皂甙是存在于植物体内比较复杂的甙类化合物，它的水溶液易引起肥皂样的泡沫，且多数具有溶血特性。按其甙元结构可分为两大类，其一为甾体皂甙，另一为三萜皂甙。皂甙的极性较强，分子较大，不容易结晶，易溶于水和醇，难溶于有机溶剂，而且在同一植物中有很多结构相近的皂

8、甙存在，更增加了分离纯化的困难。现已有很多报道使用SephadexLH-20纯化皂甙。KamelH.Shakker和MirkoBernhardt等人13从Fagoniaindica中分离出具有治疗皮肤损害及防御癌症的三萜类化合物皂角苷，其中精细纯化就是使用SephadexLH-20，其流动相为17:3的Me-H2O。Susanne