鲤斜管虫生物学特性研究

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1、福建师范大学硕士学位论文鲤斜管虫生物学特性研究姓名：吴静申请学位级别：硕士专业：发育生物学指导教师：汪彦愔20090501中文摘要目的对福州地区养殖金鱼中鲤斜管虫的流行及病害情况进行初步调查及虫种鉴定，探讨鲤斜管虫的培养方法及环境因子对其种群密度的影响并从基因水平研究其分子系统发育，从而为鲤斜管虫的后续研究及同类纤毛虫的培养和研究提供借鉴和依据。方法(1)2007年l1月一2008年11月采用调查访问及对病鱼镜检的方法对金龟养殖场的养殖鱼苗及福州花鸟市场出售的会鱼进行调查，对从病灶处分离出的病原体，采用活体及染

2、色观察加以鉴定；(2)采用米粒浸出液、0．3∥L牛肉膏、O．3∥L蛋白胨、0．3∥L酵母浸膏等四种培养液进行培养，运用实验生态学方法探讨温度、营养、pH对其种群密度及自然增长率的影响；(3)测定鲤斜管虫

3、rI’s一5．8S基冈序列，使用PHYLIP3．66软件及MEGA3．1软件构建了NJ及UPGMA两种分子系统发育树结果(1)病原体经鉴定为鲤斜管虫，鲤斜管虫病在福州地区养殖金鱼中流行较严重，特别是鱼苗感染后病死率较高。(2)鲤斜管虫在米粒浸出液中的生存时川较其它三组培养液长，因此米粒培养液适于实验室保种，而其

4、它三种培养液中的虫体体积较米粒浸出液中大；四组培养液中18℃与22℃之间种群密度及自然增长率未见显著差异，因此22℃仍为其繁殖最适温度(P>0．05)；鲤斜管虫可在pH5．O～10．0环境中生存，但种群密度在pH5．0、pill0．0时与其它各pH之间存在显著差异(P<0．05)，而pH6．0时不但种群密度最高，且r值最大，G最小，说明这一pH范围内最适合鲤斜管虫的繁殖。(3)结果表明无论用何种软件鲤斜管虫都表现出与四膜虫亲缘关系最接近，而与同一属的钩刺斜管虫亲缘关系较远。关键词：鲤斜管虫，种群密度，自然增长率

5、，ITS-5．8S，分子系统发育中文文摘鲤斜管虫是一种淡水鱼体表寄生性纤毛虫，可感染多种淡水鱼，常引起夏花鱼种及越冬鱼种死亡，幼鱼和成鱼都可感染，但主要危害幼鱼，对鲤斜管虫的研究，目前国内仅限于形态、形态发生、生活史、流行病学调查及药物治疗方面。本文首先介绍了福建省水产养殖概况及寄生虫病造成的危害，列举了引起鱼类感染的常见寄生性纤毛虫，说明对鲤斜管虫进行研究的必要性，并对福州地区养殖余鱼的鲤斜管虫病进行了初步调查，从病灶处分离出病原体进行鉴定，确定其为鲤斜管虫，并从实验生态学角度出发研究温度、营养及pH值三种环

6、境因子对其自然增长率及种群密度的影响，测定了鲣斜管虫ITS．5．8S基因序列，构建了系统发育树，对其系统发育进行初步研究，以期从基因水平上揭示其与其它纤毛虫的亲缘关系。论文内容概括如下：2007年11月一2008年11月采用调查访问及对病鱼进行镜检的方法对福州郊区金鱼养殖场的养殖鱼苗及福州花鸟市场出售的金鱼进行调查，发现鲤斜管虫病在养殖会鱼中流行较严重，特别是鱼苗感染后病死率较高。对分离出的病原体。采用活体及染色观察对其进行形态上的描述，并鉴定为鲤斜管虫(Chilodonellacyprini)，属动基片纲(K

7、inetofragminophorea)，下口亚纲(Hypostomatia)，管口目(Cyrtophorida)，斜管科(Chilodonellidae)，斜管虫属(Chilodonella)。由于鲤斜管虫的培养方法未见报道，因此参照海水纤毛虫的方法设计培养液，共选用四种培养液：米粒浸出液、0．3∥L牛肉膏培养液、0．39／L蛋白胨培养液、0．39／L酵母浸膏培养液，分别在4"C、18"C、22℃三个温度下培养，此外还研究了不同pH环境下鲤斜管虫的生长情况，共设置pH5．O-、,pHlO．0六个梯度，以上所得

8、结果均以SPSS13．0软件进行分析，对其种群密度、自然增长率及世代时I’日J进行计算，用One．wayANOVA方法进行差异显著性分析，显著性水平设置为P<0．05，经分析认为：(1)同一培养温度下不同培养液对鲤斜管虫种群密度的影响无显著差异(P>0．05)，但米粒组中鲤斜管虫生存时间较其它三组培养液长，因此米粒培养液适用于实验室保种；(2)不同温度时只有米粒组种群平均密度在4"C时表现出明显低于其它两个温度(PO．05)。而四组培养

9、液中18"C与22"C之间种群密度未见显著差异，据资料称鲤V福建师范人学吴静硕十学位论文斜管虫繁殖最适温度为12"--18℃，但本实验根据结果认为22℃仍为其繁殖最适温度。四组培养液中的自然增长率都表现出4"C与18。C、22*(2之间存在显著差异(PO．05)，说明4"C时鲤斜管虫的繁贿速度明显减慢，低温对其繁殖造成了影响；其世代时阳