核桃次生物质抗烟草花叶病毒活性的研究

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1、Y1133198分类号；Q躺UDC：至墨L主_匿级：公：!壬学校代码：10712研究生学号：SY20040836西北农林耕提大学2007届攻读硕士学位研究生学位(毕业)论文核桃次生物质抗烟草花叶病毒活性的研究学科专业研究方向研究生指导教师完成时间挞亡焦堂加互王毽越丕握塑堑丝堂量王撵基舾堡翟捶拉副煎援三QQ土生五旦中国陕西杨凌核桃次生物质抗烟草花叶病毒活性的研究摘要植物病毒病是农作物的重要病害之一，本文就核桃次生物质对烟草花叶病毒侵染心叶烟的抑制作用进行了初步研究，研究结果如下：(1)在定性预试的基础上，以烟草花叶病毒(Tobaccomo

2、saicvires，TMv)为研究对象，以核桃叶、青皮为材料，采用不同溶剂提取(萃取)核桃次生物质，对提取物进行抗TMV活性测定，结果表明，核桃青皮提取物对TMV侵染心叶烟的抑制作用优于核桃叶；核桃叶、青皮中抗病毒活性物质以低级性和中等极性物质为主；活性物质的提取以95％乙醇冷浸物效果最好，青皮乙醇冷浸提取物对烟草花叶病毒侵染心叶烟的抑制率为88．97％。核桃叶、青皮的95％乙醇冷浸提取物经系统溶剂萃取后萃取物活性明显降低，说明95％乙醇冷浸物的高抑制率可麓是由于多种活性成分协同增效的结果。(2)首次采用活性跟踪手段进行核桃青皮中抗病毒

3、(TMV)活性成分的分离研究。对核桃青皮乙酸乙酯萃取相不同层析组分的抗病毒活性测定结果表明，在洗脱出的7个组分中，抑制率超过50％的组分有3个，其中Pl的抑制作用显著，抑制率为71．37％，P2的抑制率为65．43％，P4的抑制率为54．16％。(3)Pl、P2和P4经二级柱层析，洗脱组分对TMV侵染心叶烟均有明显的抑制效果，在供试浓度为5mg·mL。1时，抑制率大于核桃青皮乙酸乙酯萃取物抑制率(62．71％)的组分有7个，其中抑制率超过75％的有3个，分别是P2-4(83．94％1、P1．5(80．56％)．P1．6(75．24％)，

4、由此可见，P2-4、P1．5，PI．6是进一步分离和纯化抗病毒活性物质的主要部分。(4)Pl一5，P1．6经三级柱层析后，在供试浓度为2mg·mUl时，分离组分对TMV侵染心叶烟的抑制率大于75％的有2个，分别为P1．5-4(86．00％)、P1．6-2(76．70％)，说明P1．5-4是主要的抗病毒活性组分。(5)P1．5-4经四级柱层析后，在供试液浓度为lmg·mL"1时，洗脱组分对1Mv侵染心叶烟有明显的抑制效果，抑制率都达到50％以上，其中P1．5-4．2抑制效果最佳，达到87．73％。P1．542经SephadexLH．20和

5、重结晶得到化合物A，A在供试浓度为lmg·mL。1时的抑制率为86．92％，与P1．5-4．2的抑制率近似。说明化合物A是乙酸乙酯萃取物中主要抗病毒活性成份之一。关键词：核桃；次生物质；烟草花叶病毒；活性跟踪；抗病毒STUDYONANTI．TMVOFSECONDARYSUBSTANCESFROM职!札NUTABSTRACTPlantvirosisisoneoftheimportantdisea∞sofcrops．Thisarticlestudiedontheanti-virusactivitiesofsecondarysubstance

6、sfromwalnutmaterials．Theresultswel-eshownasfollows：(1)Basedonthechemicalpretestandbioassayresults，丽tlltobaccomosaicvirus(TMV)astestorganism．differentsolventsweIeusedtoextractsecondarysubstancesfromthewalnutleavesandgreenseedease．Theanti-virusactivitiesofextractswereteste

7、d．TheresultsindicatedthattheinhibitionactivityoftheextractsfromwalnutgreensecdcaseonTMVinfectiontoNicotianaglutinosaishigherthanthattheextractsfromwalnutleaves．Theanti—viruscomponentsfromwalnutleavesandgreenseedcasearcmainlycomponentsoflowandmoderatepolarity．Using95％enth

8、anolassolvent，theinhibitionactivityofextractsisthebestandinhibitingrateofextractfromwalnutgreenseedca,跎