皱皮木瓜中齐墩果酸的提取、鉴定、增溶及抗肿瘤活性研究

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1、武汉工业学院硕士学位论文皱皮木瓜中齐墩果酸的提取、鉴定、增溶及抗肿瘤活性研究姓名：袁志超申请学位级别：硕士专业：食品科学与工程指导教师：汪芳安20070601摘要摘要皱皮木瓜为我国传统中药，药食同源，含有丰富营养物质，具有很高的研究价值。本文采用现代仪器手段对木瓜中生物活性成分齐墩果酸提取分离、结构鉴定等进行了一系列研究工作，并探讨了木瓜提取物对H22荷瘤小鼠肿瘤抑制和增强免疫作用。为木瓜及其保健产品的研发提供科学依据。主要研究结果如下：1.皱皮木瓜中齐墩果酸分析方法的建立通过高效液相色谱法发现湖北资丘

2、木瓜中含有齐墩果酸。建立了同时测定木瓜中齐墩果酸最佳色谱条件，即：色谱柱：ODSC18柱（5µm，250mm×4.6mmi.d.）；流动相：甲醇/水/冰醋酸=88/12/0.02（v/v/v）；流速：1.0mL/min；柱温：25℃；检测波长：210nm；灵敏度：0.01AUFS；进样量：20µL。结果表明，齐墩果酸色谱峰形较好。同时测定了皱皮木瓜中齐墩果酸平均含量为0.72％。2.皱皮木瓜中齐墩果酸提取工艺研究探讨了影响齐墩果酸提取的因素水平，由正交实验得出，木瓜中齐墩果酸最优提取条件为木瓜原料粒度为

3、60目，在60℃下，用95％酒精回流提取3h，料液比为1：8（w/v），提取2次。3.皱皮木瓜中齐墩果酸分离纯化、结构鉴定研究本章用重结晶方法分离纯化木瓜中齐墩果酸，此法方便、简单，齐墩果酸经多次重结晶后，纯度达98.6％。用液质联用（HPLC-MS）、高效液相色谱（HPLC）、红外光谱（IR）、紫外可见光谱（UV-VIS）、差热扫描（DSC）、电镜扫描（SEM）等手段对分离得到的结晶进行分析，结果表明该结晶纯度高，理化性质与文献一致。4.皱皮木瓜中齐墩果酸的增溶研究本章对三因素搅拌时间、搅拌温度及混合

4、比例进行实验，确定了包合物中齐墩果酸包埋效果最佳工艺为以N齐墩果酸：Nβ-环糊精为1：3的摩尔比在50℃下水浴搅拌加热4h。所得包合物齐墩果酸溶解度平均提高13.4倍。5.皱皮木瓜提取物体内抗肿瘤与增强免疫活性研究采用雌性昆明种小鼠，随机分为6组进行实验。结果显示，高剂量组提取物对小鼠H22肿瘤抑瘤率可达26.47％，肿瘤组织病理学观察表明所设剂量组对小鼠体内H22荷瘤均有一定的抑制作用。提取物能增强荷瘤小鼠迟发型超敏反应、提高血清溶血素含量、增强腹腔巨噬细胞的吞噬能力、提高小鼠NK细胞活性，表明木瓜中

5、齐墩果酸和熊果酸能提高荷瘤小鼠免疫力，对肿瘤有预防作用。同时还能显著提高荷瘤小鼠血清中SOD含量（P<0.01），降低MDA含量（P<0.01），表明木瓜中齐墩果酸和熊果酸可提高荷瘤小鼠机体抗氧化能力，有良好的抗脂质过氧化作-I-搞要用。关键词：皱皮木瓜，齐墩果酸，熊果酸，测定方法，结构鉴定，β-环糊精，包合物，抗肿瘤，增强免疫II摘要ABSTRACTChaenomelesspeciosacontainsanabundanceofnutritioncomponents,whichisatradition

6、alChineseplantusedasherbandfood.Thepaperinvestigatedtheextraction,isolationsandstructuresofoleanolicacid(OA)fromChaenomelesspeciosawiththeadvancedmethods.Theantitumoractivityandimmunologicenhancementeffectsontumor-bearingmicewerestudiedatthesametime.Thes

7、eresearcheslaidanusefulfoundationforstudyingChinesequinceandfunctionalproduct.Themainresultsareasfollows:1.EstablishedanewanalysismethodforOApresentedinChaenomelesspeciosabyHPLCHubeiprovinceismainlyoneofproducingareasforChinesequince.OAexistedinChaenomel

8、esspeciosawasidentifiedbyHPLC.AhighperformanceliquidchromatographicmethodfortheanalysisofOAhasbeenestablished.Theoptimumconditionswere:column,ODSHypersil-C18（5µm，250mm×4.6mmi.d.）;mobilephase,methanol：water：aceticacid=88：12