运用镧系金属探针的顺磁及发光特性研究蛋白质相互作用

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1、⑧万方数据论文作者签名：指导教师签名：论文评阅人1：评阅人2：评阅人3：评阅人4：评阅人5：黄孵答辩委员会主席：吴益差』数援』浙江太堂委员1：廑潼纽究员』主銎瞳盛这堑数压委员2：鱼俏笙』教授』浙江太堂委员3：翅虚』数援』浙江太堂委员4：刘住』数援』浙江太堂答辩日期：2014。5．30万方数据Author'ssignature：￡!兰竺g!呈望一‘●‘·Supervisor7ssignatureExternalI沁Viewers：丛Q鲻堕i鲤丛Q型堡i鲤』迪Q型坐i鲤』迪Q幽[堕迦』迪Q掣堡i鲤ExaminingCommitteeChairperso

2、n：￡￡Q鱼墨墨Q!进Xi：丛星iZZh自i堑g羔垣iY曼堡i鲤ExaminingCommitteeMembers：￡煦鱼墨墨Q!H曼Qi垒Q：』逃迢h自i堑g!也iy曼堡i鲤￡煦鱼墨墨Q￡至垃避h自i堑g圣也iy曼￡墨i鲤￡￡Q叁；墨墨Q!Li丛)№i丝h自i堑g!丛iY星!墨i鲤Dateoforaldefence：2014．5．30万方数据浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得浙江大

3、学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：靠撒签字日期：b阡年易月牛日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解浙江大学有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阕。本人授权浙江大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：黄飚签字日期：b竹年0月峰日铸√日认啦底／莎，f-¨．Jl厶彤协捌础春

4、瑚参阳碓字万方数据浙江大学博士学位论文致谢致谢衷心感谢我的导师张纬萍副教授对我的悉心指导与无私帮助。感谢张老师把我带入科学研究的世界。她认真钻研的科学态度，开阔的视野，以及对指导学生的无私付出，都是我切身感受到的。张老师的谆谆教诲，我已牢记在心，必将使我受益终身。衷心感谢导师中科院武汉物数所唐淳研究员的悉心指导与无私帮助。唐老师丰富渊博的专业知识，一丝不苟的治学态度，对科学的执着精神等，让我受益匪浅，是我终身学>-j的榜样。衷心感谢我的导师魏尔清教授对我的关怀与帮助。魏老师认真严谨的治学态度、勤勉敬业的工作精神，以及对同事后辈学生等的关怀，是我心底

5、里十分敬佩的，是我人生中学>--j的榜样。衷心感谢卢韵碧副教授、方三华老师、杨媚媚、杨菊、章璐老师的关心与帮助。感谢物数所刘主、邢琼、张一弛、顾新华、董旭、朱海丽、陈少敏、蒋文学、阳雨虹、龚洲、郭大川、罗凡、高运苓、叶炎生、白佳、戴晨烨等同学的帮助。感谢浙大黄雪琴、刘丽英、张霞燕、石巧娟、赵冰、张丽媛、徐丽华、王峰、林卡娜、蔡蓓蕾、骆江云、王欣欣、余舒莹、张壮、袁绮艺、韩雪、张猛、黄静、王晓蓉、徐栋敏、张晓琴、刘志娴、赵明飞、陆佳彤等同学的帮助。感谢我的父母、家人与朋友对我的关心和帮助。特别感谢我的妻子谢添娇对我的理解与支持，感谢她的默默付出。他们

6、是我人生路上的精神支柱。万方数据浙江大学博士学位论文中文摘要运用镧系金属探针的顺磁及发光特性研究蛋白质相互作用浙江大学医学院博士研究生导师摘要药理学黄鹏魏尔清教授张纬萍副教授研究背景：镧系金属属于稀土元素，其中的钆具有良好的顺磁特性，而铽具有良好的发光特性。在生物医学研究领域中，镧系金属探针的顺磁及发光特性通过溶液核磁共振及荧光波谱学技术，可以被用来标记蛋白质，并进行蛋白质相互作用的研究。大肠杆菌的磷酸转移酶系统(phosphotransferasesystem，PTS)中存在着较为复杂的磷酸化反应网络，其中一条经典信号通路是磷酸基团由磷酸烯醇式丙

7、酮酸(PEP)依次经过酶EI、HPr，最后传递给酶EIIA。酶EIIA与特定糖类吸收相关，例如EIIAGl。，EIIA川和EIIAM锄分别对应葡萄糖，甘露醇和甘露糖的吸收。而磷酸基团传递是依靠相互作用的蛋白质复合体完成的，并且其中很多都是相互作用很弱的瞬时遭遇复合体(transientencountercomplex)。利用核磁共振(NMR)中的顺磁弛豫增强(Paramagneticrelaxationenhancement，PRE)技术，可以检测到这些弱相互作用和低丰度复合体的存在。基于细胞信号传导网络化特征和STRING数据库推测，PTS中EI

8、和EIIA之间可能存在相互作用。因此，采用基于钆的顺磁探针，利用PRENMR技术对EI和EIIA间可能的相互作用进行研究将