脂肪源间充质干细胞联合神经生长因子和atelocollagen支架对小鼠脊髓损伤的修复作用

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时间:2019-03-01

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1、TheEffectofMouseAdipose--derivedMesenchymalStemCellsandNeuralGrowthFactorscombinedwithAtelocollagenScaffoldonRepairofNerveFunctionafterSpinalCordInjuryinMiceAThesisSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate:JiaYangyangSupervisor:ProfiLuoJiankaiSchoolofBasicMedicalScienceXinxiangMedicalUniversity学

2、位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:灌阳p口日期:动哗年}月了日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权新乡医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等

3、复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“-4”):1.保密口,在一年解密后适用本授权书。2.不保密口。作者签名:\竞阳阳日期:为,中年岁月了日~导师签名:期:刃,够年,月夕日目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.1Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.z}—1L——L日lJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..20讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..23小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..27附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37综述:脊髓损伤神经再生的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..40附录:常见英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..52攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..53新乡医学院硕士学位论

5、文脂肪源间充质干细胞联合神经生长因子和胶原支架对小鼠脊髓损伤的修复作用摘要背景脊髓损伤(Spinalcordinjury,SCI)是一类严重的中枢神经系统疾病。脊髓在受到外界创伤性刺激后会引起细胞死亡、组织水肿、胶质瘢痕形成和脊髓运动功能丧失。这些病理改变会抑制神经细胞和轴突的再生。目前,对于损伤修复的研究很多,通过植入干细胞是其中的热点之一。脂肪来源间充质干细胞(adiposetissue—derivedmesenchymalstemcells,ADMSCs)是目前研究很多的靶细胞,其优点在于取材方便、来源充足:神经生长因子是参与损伤神经再生和功能修复的重要因子;将它们与胶原蛋

6、白支架联合移植,不仅能桥接脊髓断端,促进神经细胞再生、定向分化和迁移,而且对胶质瘢痕有一定的抑制作用,利于脊髓损伤后神经功能的恢复。但是,到目前为止,所有实验结果只能在一定程度上恢复脊髓的神经运动功能。目的研究ADMSCs向神经方向分化潜能,探讨ADMSCs和神经生长因子及胶原蛋白支架联合移植到脊髓损伤部位,观察移植后神经生长因子及胶原蛋白支架对神经修复的作用。方法1.小鼠脂肪间充质干细胞的分离、培养和纯化:取6.8周龄小鼠的腹股沟脂肪组织,消化分离ADMSCs,用差速贴壁法对ADMSCs进行原代培养,观察其细胞的形态和生长情况。2。小鼠ADMSCs表面抗原和多向分化能力的鉴定:

7、利用流式细胞仪检测第3代ADMSCs表面抗原CD29、CD44和CD45的表达。体外将ADMSCs分别进行成骨、成脂肪、成神经诱导,以及采用转基因N.cadherin的方法诱导ADMSCs成神经;采新乡医学院硕士学位论文用茜素红检测成骨诱导的效果;油红O检测成脂诱导的效果;GFAP、NF、NSE、MAP2、13-tubulin等检测成神经诱导的效果。3.将小鼠ADMSCs与神经生长因子及胶原蛋白支架体外共培养,了解支架的细胞学相容性,并用荧光显微镜观察共培养复合物的空间结构和植入

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