酸马奶酒中乳酸菌产ai-2信号分子的研究

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1、内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：蘸暨苞Et期：型丝么左．内蒙古农业大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工

2、作的知识产权单位属内蒙古农业大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：奁堕篷指导教师签名：耋曼塑!鱼，日期：垫!垒≤!&摘要lIlllIHlllllllllllllqlllllllllllllllllllllllIY2600744从群体感应角度对酸马奶酒中的乳酸菌产趟．2信号分

3、子进行研究。首先利用四因素三水平的正交试验对报告菌株哈维氏弧菌BBl70进行最佳冻干保护剂的选择，然后检测分离自酸马奶酒中的十一株乳酸菌在不同培养时间点的AI．2活性，选择其中具有代表性的两株乳酸菌，再分别检测添加酵母菌的代谢产物及在脱脂乳中共培养后产AI．2活性的变化情况，为从群体感应角度研究乳酸菌及酵母菌的共生机理奠定基础。通过对检测AI．2的报告菌株哈维氏弧菌BBl70真空冷冻干燥过程中的保护剂进行筛选，选出四种效果较好的单因素保护剂分别为为脱脂乳、L．谷氨酸钠、蔗糖和葡萄糖。然后通过四因素三水平的正交试验，确定最佳的复合保护剂配方是：10％脱

4、脂乳，1％L．谷氨酸钠，2％蔗糖，1．25％葡萄糖，使菌粉的荧光强度达到216804AU，且室温放置两个月后仍能达到39203AU。利用哈维氏弧菌BBl70报告菌株对分离自酸马奶酒中的十一株乳酸茵产AI．2活性的检测结果表明，只有1．3和1．3．1菌株不能产生AI．2信号分子，LC5、2—1等其余九株都可以产生。且只有6．1．1在稳定期开始产生，其余八株都在对数期就开始产生。选择前期试验研究较多的乳酸菌LC5及产AI．2活性最高的2．1为代表性菌株，研究YE4、J6、儿1、J23．1四株酵母菌的代谢产物对二者产AI一2的影响为：四株酵母菌的代谢产物在

5、一定时间内对LC5AI．2的产生都有一定的促进作用；对2．1，只有YE4有促进作用，其余都表现为一定的抑制作用。四株酵母菌与LC5及2．1共培养后对各自产AI．2活性的影响为：YE4在共培养13h时，对LC5有促进作用，其余时间则无影响，其余三株菌对LC5都表现为抑制作用；对2—1则四株酵母菌都表现为抑制作用。关键词：群体感应；AI．2信号分子；哈维氏弧菌BBl70；乳酸菌；酵母菌StudyofAI一2SignalMoleculeinLacticAcidBacteriafromKoumissAbstractActivityofAI一2signalmo

6、leculeinelevenlacticacidbacteriaswasstudyinquorumsensingangle．Firstly,thebestvacuumfreezedryingprotectiveagentwaschoicedforreporterstrainVibrioharveyiBB170byorthogonaltestoffourfactorsandthreelevels．Secondly,theAI-2activityofelevenstrainsoflacticacidbacteriaatdifferentcultureti

7、meweretested．Thirdly,thechangesofAI-2activityweretestedwhentworepresentativestrainsoflacticacidbacteriawereaddedtoyeastmetabolitesandCO-culturedwithyeasttolaythefoundationfortheresearchofsymbiosismechanismoflacticacidbacteriaandyeast．Thebestformulaofcompositeprotectiveagentofre

8、porterstrainVibrioharveyiBB170was：10％skimmilk，1％L-sodi